酶的作用机制和酶的调节 .pptxVIP

酶的作用机制和酶的调节溶菌酶的结构白色为Glu35和Asp52二、胰核糖核酸酶A (pancreatic ribonuclease A,RNase A)三、羧肽酶A(carboxypeptidaseA)胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶、弹性蛋白酶氨基酸序列的比较。 胰凝乳蛋白酶催化的裂解反应的动力学。乙酸基以共价键与酶的Ser195结合,因而释放较晚。底物结合底物形成共价ES复合物His57质子供体C-N键断裂胰凝乳蛋白酶反应的详细机制(1)羰基产物释放水亲核攻击四面体中间物的瓦解羧基产物释放胰凝乳蛋白酶反应的详细机制(2)五、天冬氨酸蛋白酶(asparticproteases) 若为共价催化,会有两种中间物之一,两种中间物均未能找到,说明这一类酶为非共价催化。 第五节　酶活性的调节控制变构酶(别构酶)(1)变构酶:有的酶能够与某些化合物(称为变构剂)发生非共价结合,引起酶分子构象的改变,对酶起到激活或抑制的作用,这类酶通常称为~。(2)别构效应:别构酶通过与调节物非共价的结合,诱导或稳定住酶分子的某种构象来调节酶促反应速度及代谢过程的这种效应称为~。(3)变构调节作用:由于变构剂与变构中心的结合而引起酶活性改变的现象则称为~。结构特点: (1)活性中心:结合部位和催化部位 (2)变构中心:特别的调控部位 注意:变构中心不是酶活性中心的组成部分。一、别构调控(allosteric regulation)(一)别构酶的性质1、别构调节: 别构酶:均为寡聚酶,除活性部位外,还有能够同效应物(调节物)结合的调节部位。效应物或别构剂: 正效应物或别构激活剂;负效应物或别构抑制剂 同促效应与异促效应:正或负协同效应、正或负异促效应。别构酶的调控方式有四类: 正协同效应:酶的一个亚基与底物结合后,其他亚基与底物的结合能力加强,v-[S]曲线为S形。 负协同效应:酶的一个亚基与底物结合后,其他亚基与底物的结合能力减弱,v-[S]曲线为平坦的双曲线。正异促效应:负异促效应(二)天冬氨酸转氨甲酰酶的性质 天冬氨酸为正协同效应剂; ATP为别构激活剂; CTP为别构抑制剂。ATP与CTP相互竞争调节部位。其生物学意义? p414含2个催化亚基, 3个调节亚基(2)ATCase活性调节的机理 有催化活性的构象 无催化活性的构象 酶的别构作用通过大的变化来转达四级结构用底物类似物PALA与酶结合后,催化三聚体移动了1、2nm底物与酶结合后催化三聚体发生了移动,两个结构域更加靠近,由T-R,从而形成了最优化的活性中心、p417ATCase酶的别构效应相当大的立体空间范围内起着调节活性的作用1、活性部位较远2、催化部位与最近的调节部位距离较远。 底物的协同结合和CTP的反馈抑制是通过长距离而传递的。底物结合到ATCase上引起高度协同的别构转变、 ATP和CTP通过改变T和R态之间的平衡来调节ATCase的活性、(三)3-磷酸甘油醛脱氢酶 3-磷酸甘油醛脱氢酶是负协同效应酶的典型代表。3-磷酸甘油醛脱氢酶有4个亚基,一个亚基与NAD+结合后发生构像变化,其它亚基与NAD+结合的能力下降(表10-8),表现为负协同效应。 由于负协同效应,在NAD+浓度特别低的情况下,糖酵解过程仍然能以较快的速率顺利进行。(2)甘油醛-3-磷酸脱氢酶的调节机理 别构酶的性质 别构酶有受调控的动力学特征 1、 在其分子内、不同的空间位置上的特定位点具有 传递改变构象信息的能力; 2、 具有在不同外界环境条件时,作出选择, 以达到对代谢过程的调节控制。 3、 正协同效应(S型曲线)与负协同效应(表观双曲线) 别构酶的结构特征 1、 几乎都是寡聚酶,具有四级结构,分子较大,常常表现出单体酶没有的特别性质; 2、 有能够结合底物的活性中心外,还有能够结合调节物的别构中心。二者处在不同的部位上。 3、 别构酶不遵循米氏方程。正协同效应别构酶与米氏酶动力学比较 负协同效应别构酶与米氏酶动力学比较 如何区分米氏酶与别构酶？ koshland建议用饱和比值(saturation ratio, Rs) 典型的米氏酶 RS=81 具有正协同效应的别构酶 RS81 具有负协同效应的别构酶 RS81 更常用的是Hill系数法,以log(v/(Vm-v))对log[S]作图,曲线的最大斜率为Hill系数,米氏酶等于1,正协同酶大于1,负协同小于1。n为Hill系数,米氏酶Hill系数T状态（对称亚基）SSSSSSSSSSSSSST状态（对称亚基）对称亚基对称亚基齐步变化别构酶协同效应的机制别构酶的齐变模型解释正协同、正或负异促效应SSSSSSSSSSSSSS亚基全部处于T型亚基全部处于R型依次序变化别构酶的序变模型1966年由Koshland、Nemethy和Filmer提出。 解释异促效应目前认为齐