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核酸与蛋白质一样,是一切生物机体不可缺少的组成部分。 核酸是生命遗传信息的携带者和传递者,它不仅对于生命的延续,生物物种遗传特性的保持,生长发育,细胞分化等起着重要的作用,而且与生物变异,如肿瘤、遗传病、代谢病等也密切相关。 因此,核酸是现代生物化学、分子生物学和医学的重要基础之一。 核酸的发现 1868年,F. Miescher从脓细胞核中分离得到一种酸性物质----核素(脱氧核糖核蛋白) 1889年, Altman对核素进行了纯化,把不含蛋白质的核素称为核酸(nucleic acid)。 1944年,Avery通过肺炎球菌转化试验首次证实核酸是携带遗传信息的物质。 本章简要讲解核酸的化学组成、结构、理化性质、及分离纯化的主要方法 1953年, Watson and Crick 提出DNA 双螺旋结构模型,为现代分子生物学与分子遗传学奠定了基础。 1.1核酸的种类与分布 核酸分为两大类,即: 脱氧核糖核酸(DNA)--- Deoxyribonucleic Acid 核糖核酸(RNA)--- Ribonucleic Acid。 脱氧核糖核酸(DNA) 主要细胞核,线粒体、叶绿体少量 类核(原核细胞) tRNA :10-15% 核糖核酸(RNA) mRNA :5-10% 细胞质 rRNA :75-80% 1.2 核酸作用简介 DNA:含有生物物种的所有遗传信息,分子量一般都很大。 DNA为双链分子,其中大多数是链状结构大分子,也有少部分呈环状结构。 mRNA:信使RNA,蛋白质合成中起决定氨基酸顺序的模板作用 tRNA: 转运RNA,蛋白质合成中起携带活化氨基酸的作用 rRNA:核糖体RNA,与蛋白质结合形成核糖体,是合成蛋白质的细胞器。 1.3 核酸的化学组成 核酸 3`,5`-磷酸二酯键 核苷酸 磷酸酯键 核苷 磷酸 糖苷键 碱基 脱氧核糖(核糖) 1.3.1 碱基种类-嘌呤 1.3.1 碱基种类-嘧啶 碱基都具有芳香环的结构特征。嘌呤环和嘧啶环均呈平面或接近于平面的结构。 嘌呤碱和嘧啶碱分子中都含有共轭双键体系,在紫外区有吸收(260 nm左右)。 DNA含胸腺嘧啶,RNA含尿嘧啶 1.3.2 戊糖 组成核酸的戊糖有两种。DNA所含的糖为β-D-2-脱氧核糖;RNA所含的糖则为β-D-核糖。 1.3.3 核苷 糖与碱基之间的C-N键,称为C-N糖苷键 1.3.4 核苷酸 核苷酸是核苷的磷酸酯。作为DNA或RNA结构单元的核苷酸分别是5′-磷酸-脱氧核糖核苷和5′-磷酸-核糖核苷。 核酸中也存在一些含量极少的稀有碱基。 核苷酸还可以进一步磷酸化形成核苷二磷酸和核苷三磷酸,其第二个及第三个磷酸键是高能磷酸键,在能量转换中起重要作用 备注 核苷酸还可以发生环化。cAMP(3’,5’- 环腺嘌呤核苷一磷酸)和 cGMP( 3’,5’-环鸟嘌呤核苷一磷酸)的主要功能是作为细胞之间传递信息的信使 cAMP 和 cGMP 的环状磷酯键是一个高能键 2. DNA的分子结构 “Chargaff 定则” 2.1 DNA的一级结构 2.2 DNA的二级结构 2.3 DNA的三级结构 2.4 DNA的存在形式 “Chargaff 定则” 一种生物的所有体细胞的DNA的碱基组成是相同的,这个碱基组成可作为该物种的特征 2. 不同生物碱基组成有很大差别,可用“不对称比率”---(A+T)/(G+C)表示 3. 亲缘关系相近的生物,其碱基组成相似,即不对称比率相近似 4. 同一种生物内,DNA分子中A=T,G=C 5. 同种生物的DNA分子中A+T=G+C 2.1 DNA的一级结构 DNA的一级结构是指DNA分子中四种脱氧核糖核酸的排列顺序,即四种脱氧核糖核酸通过3’,5’—磷酸二酯键连接起来的直线性或环形多聚体 多聚核苷酸特点 通过3’,5’—磷酸二酯键连接起来的 C5′带有一个自由磷酸基,称为5′-磷酸端(常用5′-P表示); 另一端C3′带有自由的羟基,称为3′-羟基端(常用3′-OH表示)。 多聚核苷酸链具有方向性,当表示一个多聚核苷酸链时,必须注明它的方向是5′→3′或是3′→5′。 核苷酸链写法 由于构成核苷酸单元的戊糖和磷酸基是相同的,体现核苷酸差
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