细胞生物学第5章-细胞核.ppt

1. 核仁的超微结构 ?核仁没有被膜包裹，通过超薄切片的观察，可以区分３种基本的核仁结构组分： 　 纤维中心(fibrillar centers, FC) 　 致密纤维组分 (dense fibrillar component, DFC) 　 颗粒组分(granular component, GC) 纤维中心存在着rDNA（rRNA基因）、RNA聚合酶和结合的转录因子。FCs是rRNA基因的储存位点。 转录主要发生在纤维中心与致密纤维组分的交界处，并加工初始转录本。 颗粒组分区是核仁的主要结构，由RNP颗粒构成，是正在加工、成熟的核糖体亚单位前体颗粒。GC负责装配核糖体亚单位，是核糖体亚单位成熟和储存的位点。 2.核仁的功能 核仁的主要功能涉及核糖体的生物发生(ribosome biogenesis)，是一个向量过程：即从核仁纤维组分开始, 再向颗粒组分延续。 这一过程包括rRNA的合成、加工和核糖体亚单位的装配。 核糖体的成熟作用只发生在转移到细胞质以后, 从而阻止有功能的核糖体与核内加工不完全的hnRNA分子接近。 3.核仁周期 在细胞周期中，核仁是一个高度动态的结构，在形态和功能上都发生很大的变化。 核仁的动态变化是rDNA转录和细胞周期依赖的。 在有丝分裂的中期和后期，核仁消失；在末期，核仁重建。 核糖体（ribosome）是一种核酸和蛋白质复合体，几乎存在于所有细胞中，只有成熟的红细胞、精子细胞等细胞例外。 核糖体是合成蛋白质的场所，其唯一的功能是按照mRNA的指令，由氨基酸高效且精确 地合成多肽链。 五、核糖体 1.核糖体的类型和组成 按照分布划分： 附着核糖体 游离核糖体 按照来源划分： 原核生物核糖体 真核生物核糖体 核糖体的主要成分： r蛋白质：占40%，位于核糖体表面 rRNA: 占60%, 位于核糖体内部 一个mRNA分子上同时结合多个核糖体，由此形成的复合体叫做多聚核糖体。 2.核糖体的结构 负责DNA分子遗传信息的组织、复制和阅读。 分类： 组蛋白(histone)：与DNA非特异性结合 非组蛋白(nonhistone)：与特定的DNA序列 或组蛋白结合 （2）染色质蛋白 ①组蛋白(histone) 真核生物染色体的基本结构蛋白，富含带正电荷的Arg和Lys等碱性氨基酸，属碱性蛋白质，可以和酸性的DNA紧密结合（非特异性结合）。 聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）可以区分出5种不同的组蛋白：H1，H2A，H2B，H3，H4。 （a）核小体组蛋白(nucleosomal histone)：H2B、H2A、H3和H4,帮助DNA卷曲形成核小体的稳定结构。 　　　没有种属及组织特异性，在进化上十分保守； 组蛋白在功能上分成两组 （b）H1组蛋白：在构成核小体时，起连接作用, 它赋予染色质以极性。 有一定的种属及组织特异性，保守性低于核小体组蛋白。 ②非组蛋白 　　 主要指和特异DNA序列结合的蛋白，又称序列特异性DNA结合蛋白 (sequence specific DNA binding proteins)，可以通过凝胶阻滞实验检测。 非组蛋白的特性： 非组蛋白具有多样性，不同组织细胞中其种类和数量都不同，代谢周转快。包括核酸代谢和修饰的酶类，骨架蛋白，基因表达的调控蛋白等。 识别DNA具有特异性 　　识别信息来自于DNA序列自身，识别位点在DNA双螺旋的大沟部分。 具有多种功能，包括基因表达的调控和染色质高级结构的形成。 非组蛋白的结构模式 ?α螺旋-转角-α螺旋模式(helix-turn-helix motif) ?锌指模式(Zinc finger motif) ?亮氨酸拉链模式(Leucine zipper motif，ZIP) ?螺旋-环-螺旋结构模式(helix-loop-helix motif，HLH) ?HMG-盒结构模式（HMG-box motif） 　　　　 2. 染色质的基本结构单位— 核小体(nucleosome) 核小体是染色质包装的基本结构单位。 （2）核小体结构要点 ①每个核小体单位包括200bp左右的DNA超螺旋和一个组蛋白八聚体及一个分子H1。 ②组蛋白八聚体构成核小体的盘状核心结构。 ③146bp的DNA分子超螺旋盘绕组蛋白八聚体1.75圈, 组蛋白H1在核心颗粒外结合额外20bp DNA，锁住核小体DNA的进出端，起稳定核小体的作用。