植物离体快速培养植物快繁.pptVIP

（3）褐化问题 减轻褐变现象发生的方法： 选择合适的外植体 ： 合适的培养条件：无机盐成分、植物生长物质水平、适宜温度、及时继代培养均可以减轻材料的褐变现象。 使用抗氧化剂：在培养基中使用半胱氨酸、抗坏血酸、PVP等抗氧化剂能够较为有效地避免或减轻很多外植体的褐变现象。另外，使用0.1%-0.5%的活性炭对防止褐变也有较为明显的效果。 连续转移：对容易褐变的材料可间隔12~24h的培养后，再转移到新的培养基上，连续处理7-l0d后，褐变现象便会得到控制或大为减轻。 (4)、白化 白化苗：禾谷类植物的花药培养中经常会出现白化苗。 花粉白苗除外观上缺乏绿色外，并无其它形态上的变异。缺绿的程度由完全白色到浅黄色不等，此外，有时还存在一种叶面呈绿白镶嵌的条纹状植株，但此种植株数量甚少。 愈伤组织分化绿苗或白苗的特性是相对稳定的，由愈伤组织上芽点的颜色可以判断分化出来的将是绿苗或是白苗。 叶绿体发育不正常引起，可能由染色体断裂造成。 (4)、白化 影响花粉白苗形成的因素有：供体植物的基因型、花粉发育的时期、培养基的成分和培养条件等。 小麦、水稻和大麦的白化苗频率较高，而玉米花粉植株中白化苗却较少。除葡萄外，在禾本科以外的植物花药培养中尚未发现白化苗。 花药培养中，白化苗的比例随接种时花粉发育时期的延迟而提高，小孢子已完成有丝分裂的花药往往只能得到白化苗。 培养基对花粉白苗形成的影响主要在愈伤组织发生阶段。在小麦花药培养中12％的蔗糖比6～10％的蔗糖浓度有更高的绿苗率。高浓度的2,4－D也可使所产生的愈伤组织分化成更多的白化苗。 第二节 植物脱毒技术 植物脱毒的定义 植物脱毒原理 植物脱毒技术 一、植物脱毒的定义 目前，植物感染病毒呈增多趋势，受病毒侵染的植株生长迟缓、产量下降、品质变劣。常见的有： 蔬 菜：白菜、大蒜、葱、番茄、萝卜 果 树：柑橘、苹果、草莓、香蕉 花 卉：香石竹、各种菊花、天竹葵、紫罗兰等 植物离体快速培养植物快繁 主要内容 快速繁殖技术（定义、实验程序、影响因素、应用） 植物脱毒技术（原理、实验程序、鉴定、保存） 第一节 植物快速繁殖技术 快繁的定义 快繁的技术程序 影响快繁效果的因素 快繁的应用 一、快繁的定义 快速繁殖（rapid clone propagation）：也叫离体繁殖（in vitro propagation）、微体繁殖（Micropropagation），是指在无菌条件下，将植物体的器官、组织或细胞培养于人工培养基中，并辅以人工控制环境，使其生长出完整植株的繁殖技术。 微繁：跟常规的繁殖方法相比它是一种微型操作过程。 一、快繁的定义 离体微繁殖技术的应用，首先应归功于Morel，他在1960年首先建立了兰花离体繁殖的方法（原球茎繁殖）。 目前已有近400种植物的离体繁殖已获得成功，其中许多具有重要经济价值的花卉(如兰花、菊花、石竹)、果树(草莓、无籽西瓜、葡萄)、经济作物(马铃薯、甘蔗)、林木(桉树、杨树)均已在种苗生产上广泛应用，取得了巨大的经济和社会效益。 一、快繁的定义 荷兰是试管苗的生产王国 我国快速繁殖植物的种类达443种之多 植物种类 木本植物 园艺花卉类 禾本科 豆科 蔬菜 草本 中草药 其它 物种数 155 138 29 16 28 9 52 16 微繁图片 龟背竹试管苗 非洲紫罗兰壮苗生根 二、快繁的技术程序 无菌材料的建立 芽苗的增殖 生根及移苗 1. 无菌材料的建立 初代培养：取材 消毒 接种 培养 外植体的选择主要应考虑以下问题： 繁殖对象的品种典型性。 植物在自然条件下的繁殖特点 。尽可能取自然繁殖器官的适当部位作外植体， 外植体的取材部位和大小、生理状态。 2. 培养物的增殖 增殖方式： 腋芽增殖 愈伤组织 增殖 体细胞胚增殖 不定芽增殖 （1）、不定芽增殖 不定芽：从现存的芽以外的任何器官、组织上通过器官发生重新形成的芽称之为不定芽。 特点：繁殖系数高 遗传稳定性较好 继代次数有限 注意事项：激素浓度不能过高；避免使用2，4-D等活性强的生长素，以减少变异发生。 （2）. 腋芽增殖 腋芽进行离体培养时可不断生长，逐渐形成芽丛，反复切割和转移可不断形成新的芽丛，因此可在短时间内获得大量芽。 注意事项：这一繁殖方式一般不需要添加外源激素。 需要添加激素的可使用少量细胞分裂素，但浓度不