生化分离工程5亲和纯化.pptVIP

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  • 2022-03-28 发布于四川
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8.2.3 应用举例 1. t-PA的纯化 组织纤溶酶原激活剂(t-PA)是一种糖蛋白,具有激活纤溶酶原、促进血纤维蛋白溶解的作用,是治疗血栓等心脑血管疾病的蛋白药物。 赖氨酸、精氨酸、氨基苄脒和纤维蛋白与t-PA具有亲和结合作用,常用做亲和色谱纯化t-PA的配基。 图5-3是利用精氨酸-Sepharose 4B亲和色谱法纯化猪心组织t-PA的结果。原料为猪心丙酮粉经醋酸钾抽提、硫酸铵沉淀。 图5-3 精氨酸- Sepharose 4B 亲和色谱 2. 干扰素的纯化 干扰素(interferon,IFN) 对癌症、肝炎等疾病具有特殊疗效。 IFN主要分α、β和γ三种类型,可通过动物细胞培养或重组DNA大肠杆菌发酵大量生产。 色素亲和色谱、固定化金属离子亲和色谱和免疫亲和色谱可用于IFN的纯化。 如图5-3是利用单抗免疫亲和色谱法纯化源于大肠杆菌的重组人白细胞干扰素(rhIFN- α)的操作条件和结果。rhIFN- α的比活提高了1150倍,收率达95%。 图5-4 单抗免 疫亲和色谱法 纯化rhIFN-α 5.3 膜亲和过滤法 自20世纪80年代中期以来,把亲和色谱技术和膜分离技术两种技术有机地结合,出现了膜亲和过滤方法 。 膜亲和过滤方法包括两个分支: 亲和膜分离技术 亲和错流过滤 5.3.1 亲和膜分离 原理和特点 亲和膜(aff

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