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HPLC法测定布洛芬片含量设计方案 一、设计背景 布洛芬是一种比较常用的非甾体类的抗炎药，是20世纪50年代和60年代，是开发治疗类风湿关节炎“超级阿司匹林”的过程中长期研究的产物，具有缓解各种慢性关节炎的症状等，布洛芬具有优异的消炎镇痛作用，其作用比阿司匹林更强，比其他药物更具有安全性，现如今布洛芬的合成方法也有许多种，在工艺生产过程中形式也各不相同。通过查阅各种相关的文献，对布洛芬进行含量测定，保证其药品质量的安全性、可靠性、准确性，提供更有效的依据，为工业化生产检测需要设计出简便、科学、易懂、适用性强的含量测定法案。 图1 布洛芬化学结构 二、设计依据 布洛芬片中的主要成分是布洛芬，其具有抗炎、镇痛和解热作用，《中国药典》（2020年版第二部）采用酸碱滴定法测定布洛芬含量，但由于消耗时间长、误差较大，难以反应实验的真实质量，为进一步完善布洛芬质量控制方法，故使用HPLC法测定本制剂中布洛芬的含量，满足对布洛芬片质量控制的检测要求，达到工业生产的质量标准。 三、设计方案 (一) 仪器和试药 1.仪器 LC-10ATvp高效液相色谱仪、紫外检测仪、色谱柱、sartorius赛多利斯BSA224S电子分析天平。 2.试剂试药 （1）标准对照品 ：购自中国药品生物制品检定院，含量为98．3％ 的布洛芬片。 （2）检测样品 ：送检布洛芬片由实习单位提供。 （3）试剂 ：甲醇、乙腈为色谱纯, 其它试药、试剂均为分析纯, 水为超纯水。 （二）色谱条件 （1）色谱柱：Ve—nusil MP18柱 (4．6 mm ×250 mm ，5μm )。 （2）流动相：甲醇一已腈 一磷酸二氢钠溶液(0．02 mol／L)(50 ：25 ：25)。 （3）检测波长：263 nm ， （4）流速：1.0 m l／m in。 （5）柱温：30℃。 （三）溶液的制备 1.供试品溶液的制备 取布洛芬样品20片，进行精密称重。将所取样品研细 ，精密称取适量 (约相当于布洛芬 100 mg)，放置于容量为200 ml的容量瓶中，加入甲醇30 ml，超声15 min,再加甲醇稀释至容量瓶刻度线，摇匀滤过，即得供试品溶液。 2.对照品溶液的制备 另精密称取布洛芬对照品适量, 将其放置于容量为25ml的量瓶中, 加入甲醇溶液10ml,超声15min，再加甲醇稀释至容量瓶刻度线，摇匀，即得对照品溶液。 电子分析天平 容量瓶 （四）方法学考察 1.色谱系统和系统适用性试验 色谱柱为Ve—nusilMP18柱 (4.6 m m ×250 mm ， 5μm )， 流动相则为甲醇一已腈一磷酸二氢钠溶液 (0.02 m ol／L)(50 ：25 ：25)， 检测波长设定为263 nm ，流速为 1.0 m l／m in。 样品的进样量设定为20μl。 理论塔板数按照布洛芬计算不得低于3500。分别取布洛芬样品与标准对照品溶液进行测定。 2.回收率试验 精密称取布洛芬供试品细粉适量 (大约相当于布洛芬 25 mg)，将其置于100 ml的容量瓶中，并且分别向其中加入布洛芬对照品溶液 2、4、6 m l，按对照品溶液制备法制成 3 种不同浓度的溶液各3份 ，进行样品测定，求得布洛芬样品的平均回收率。 3.线性关系 取“对照品溶液的制备”项下的对照品贮备液适量,分别精密吸取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml置 10ml 量瓶中, 用流动相稀释至刻度, 摇匀,分别取10μl注入HPLC仪, 记录色谱图。 以浓度x (mg/ml) 为横坐标, 峰面积 (y) 为纵坐标, 进行线性回归, 得布洛芬回归方程。根据回归方程，确定线性关系是否良好。 4.精密度试验 精密量取线性关系考察项下的对照品溶液 l0μL，重复进样6 次，记录峰面积，计算平均值和 RSD。根据RSD值的结果，确定仪器的精密度是否良好。 5.重复性试验 取布洛芬供试品细粉适量, 共6份, 按“供试品溶液的制备”项下方法，平行制备6份供试品溶液, 按选定的色谱条件分别进样测定并计算含量。 （五）样品含量测定 取样品适量, 按“供试品溶液的制备”项下方法制备供试品溶液;另取对照品适量, 按“对照品溶液的制备”项下方法制备对照品溶液, 各精密量取10μl注入HPLC仪, 记录色谱, 测定峰面积, 并按外标法以峰面积计算含量。 外标法计算公式如下： C C 布洛芬片标示量百分含量= 四、设计小结 可以按照上述实施方案的配制溶液、设定相关的色谱条件、进行系统适应性试验（如不符合要求可以更换色谱柱并进行）和测定，最终求得布洛芬片含量，布洛芬的药品标示量一般在95.0