分子生物学技术在动植物病原体的检测中的应用.docVIP

分子生物学技术在动植物病原体的检测中的应用 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：分子生物学技术在动植物病原体的检测中的应用 2 二 分子生物学技术在动物生态学领域里的应用 2 (一) 系统发生 2 (二) 迁移和基因漂移 2 (三) 交配制度 3 (四) 性别确定 3 三分子诊断技术 3 (一) PCR检测技术 3 1. 常规定性PCR检测方法 4 2. 荧光定量PCR技术 4 3. PCR-ELISA技术 4 (二) 核酸杂交检测技术 5 (三) 限制性酶消化技术 5 1. 限制性片段长度多态性分析 5 2. 随机扩增多态性DNA技术 6 3. 扩增性片段长度多态性技术 6 四常用的分子遗传学技术 6 (一) DNA指纹技术 6 (二) DNA—DNA杂交 7 文2：分子生物学技术论文参考 7 0 前言 7 1 应用于农产品安全检测中的分子生物学技术 8 2 结语 10 参考文摘引言： 11 原创性声明（模板） 11 文章致谢（模板） 12 正文 分子生物学技术在动植物病原体的检测中的应用 文1：分子生物学技术在动植物病原体的检测中的应用 随着时代的飞速发展， 分子生物学领域也突飞猛进， 许多新的研究手段和技术应运而生。这些手段和技术在生物学的各个领域都有着广泛的应用。 一 分子生物学技术在动植物病原体的检测中的应用 近年来， 随着分子生物学手段和技术愈发广泛和深入的使用， 使得疾病检测的技术在水产养殖中的应用有了迅猛进展， 这很大程度上提高了水产养殖病害诊断水平， 使得检测各种病原微生物更为安全、方便、快捷。分子诊断技术基于每种病原体都含有特异性的DNA或RNA序列， 通过对病原体核酸分子的鉴定来证实病原体， 该技术能有效地把病原体鉴定到亚种， 从而具体很高的应用价值。 二 分子生物学技术在动物生态学领域里的应用 分子生物学相关的技术和手段已在动物生态学领域广泛应用， 且取得了很好的结果。其相关应用在主要在以下几个领域: (一) 系统发生 系统发生主要包括如下两个方面:一是了解物种之间的种群进化关系;二是辨别灭绝的物种。如今， mt DNA已成为其主要资料来源。 (二) 迁移和基因漂移 迁移是指具有某一基因频率的一部分种群， 迁移至基因频率不同的另一种群， 杂交并定居， 从而改变了种群的基因频率， 它是重要的种群结构的内容。而基因漂移则是由于某一种目标基因自发的进行转移， 使附近的近缘物种受到影响从而发生基因的改变， 最终生成一种新的具有目标基因优势特征的物种。 (三) 交配制度 对交配制度的研究可以衡量在自然状态下个体的繁殖成功。主要研究手段是多基因位点指纹法、单基因位点指纹法、RFLP分析法。 (四) 性别确定 性别是由特定的DNA决定的， 是单基因位点上的等位差异， 这种差异包含性染色体。现如今根据人类性别决定主要取决于Y染色体上的性别决定区域， 我们就可以运用分子生物学技术 (如做探针) 来对哺乳动物进行性别的鉴定。 三分子诊断技术 分子诊断技术目前主要包括探针杂交、核苷酸测序、PCR (聚合酶链式反应) 、和限制性酶切等， 其中PCR和核酸杂交技术是病害检测中最常用的两个方法。 (一) PCR检测技术 PCR检测技术包括常规定性PCR检测方法、荧光定量PCR技术和PCR-ELISA技术等; PCR技术又称DNA体外扩增技术。使用PCR来进行疾病诊断具有很多传统诊断方法所不具备的优点， 如操作更加简单便捷， 大大缩短了诊断时间;由于PCR技术的特异性强， 这也使得诊断的正确性有了保证。 1. 常规定性PCR检测方法 基于特定的情况设计引物， 然后进行PCR， 将得到的产物使用电泳来检验是否成功得到特定的条带， PCR扩增产物的有或无即可显示样品是否被特定的病原体感染。以上即是使用常规定性PCR检测方法进行疾病诊断的基本步骤。 2. 荧光定量PCR技术 荧光定量PCR技术是传统PCR技术的突破， 与常规性的PCR技术相比， 荧光定量PCR技术又实现了一次飞跃。该技术可以对DNA或RNA样品进行定量和定性分析， 其中定量分析又包括绝对定量分析和相对定量分析;此外荧光定量PCR技术还可以对PCR产物进行定性分析。基于上述几点， 荧光定量PCR技术在临床患病动物的治疗效果观察及指导用药方面具有重大意义， 该技术现已广泛应用于临床诊断、疾病研究及药物研发等领域。 3. PCR-ELISA技术 PCR-ELISA技术是传统PCR技术与ELISA技术 (酶联免疫吸附) 的结合， 该技术方便快捷， 有PCR仪和酶标仪即可完成， 对仪