微生物的遗传和变异.pptVIP

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诱变育种的基本环节 大多死亡 少数存活 存活率 多数未变 少数突变 突变率 多数负变 少数正变 正变率 多数幅度小 少数幅度大 高产率 投产率 多数不宜投产 少数适宜投产 出发菌株 计算出 诱变 第55页,共115页,编辑于2022年,星期日 诱变育种工作中应考虑的几个原则 选优良的出发菌株 处理单孢子(或单细胞)悬液 选用最适剂量 设计或采用高效筛选方案或方法 利用复合处理的协同效应 利用和创造形态,生理与产量间的相关指标 选择简便有效的诱变剂 第56页,共115页,编辑于2022年,星期日 挑选优良的出发菌株 生产中用过的自发变异菌株 选用具有有利于进一步研究或应用性状的菌株 采用已发生其他变异的菌株 采用对诱变剂敏感性较高的增变变 异株 第57页,共115页,编辑于2022年,星期日 处理单孢子(或单细胞)悬液 芽孢杆菌应处理芽孢 放线菌,霉菌应处理孢子 细菌指数期,放线菌霉菌要稍 加萌发后使用 出发菌株应制成均匀悬夜 第58页,共115页,编辑于2022年,星期日 选择简便有效的诱变剂 出发菌株 含诱变剂的液体培养基 接种 培养 培养 接种分离 紫外线 选择优良突变株 第59页,共115页,编辑于2022年,星期日 选用最适剂量 剂量以诱变剂浓度和处理时间来表示 合适剂量:能扩大变异幅度又能促使 变异移向正变范围的剂量 第60页,共115页,编辑于2022年,星期日 充分利用复合处理的协同效应 两种或多种诱变剂先后使用 同种诱变剂重复使用 两种或多种诱变剂同时使用 第61页,共115页,编辑于2022年,星期日 利用和创造形态,生理与产量间的相关指标 淀粉酶变色圈试验 变色圈大的为淀粉酶高产菌落 第62页,共115页,编辑于2022年,星期日 设计或采用高效筛选方案或方法 一个出 发菌株 诱变剂 处理 选出200个单 孢子菌菌株 初筛 (每株1瓶) 选出50株 复筛 (每株4瓶) 选出5 株 第一轮 第二轮 五个出发菌株 初筛 (每株1瓶) 选出50株 复筛 (每株4瓶) 选出5 株 40株 40株 40株 40株 40株 诱变剂 处理 第63页,共115页,编辑于2022年,星期日 (8)创造新型筛选方法 1、初筛:以量为主 2、复筛:以质为主 第64页,共115页,编辑于2022年,星期日 突变株的筛选方法 高产突变菌株的筛选方法 抗性突变体的筛选方法 营养缺陷型的的筛选方法 与突变株的筛选相关的几个概念 第65页,共115页,编辑于2022年,星期日 与突变株的筛选相关的几个概念 相关培养基 基本培养基:能够满足某一菌 种的野生型菌株营养要求的最 低成分的组合培养基。 完全培养基:是在基本培养基 中添加天然物质后能满足某种 微生物各种营养缺陷型的营养 要求的加富培养基。 补充培养基:是在基本培养基 中添加某种营养物质以满足该 营养物质缺陷型菌株生长需求 的加富培养基。 第66页,共115页,编辑于2022年,星期日 与突变株的筛选相关的几个概念 三类遗传型 野生型 [A+B+] 营养缺陷型 [A+B-] 原养型 [A+B+] 第67页,共115页,编辑于2022年,星期日 突变 春日霉素产生 菌的孢子悬液 · 高产突变株的筛选 琼脂块培养法筛选 春日霉素高产菌种 含供试菌种 (拮抗对象)的琼脂平板 第68页,共115页,编辑于2022年,星期日 梯度培养皿法 强抗性 中抗性 弱抗性 含异烟肼 接敏感菌 含突变株 抗药性突变株的筛选 第69页,共115页,编辑于2022年,星期日 营养缺陷型的筛选办法 诱变剂处理 淘汰野生型:青霉素浓缩法、菌丝过滤法、 差别杀菌法 检出缺陷型:夹层培养法、限量补充培养法、逐个 检出法、影印接种法 鉴定缺陷型 中间培养 第70页,共115页,编辑于2022年,星期日 淘汰野生型(青霉素浓缩法) 培养基(含青霉素) 接入诱变菌液 (含抗性突变株) 涂布 培养 第71页,共115页,编辑于2022年,星期日 淘汰野生型(差别杀菌法) 1.适用于细菌的芽孢 2.原理:将诱变处理的芽孢接种到基本培养基上,野生型的芽孢生长成营养细胞,而缺陷型的不能生长成营养细胞。 第72页,共115页,编辑于2022年,星期日 检出缺陷型(夹层培养法) 小菌落是第二次长起来的(营养缺陷型) 第73页,共115页,编辑于2022年,星期日 检出缺陷型(限量补充培养法) 微量蛋白胨的基本培养基上 小菌落是营养缺陷型突变株 第74页,共115页,编辑于2022年,星期日 检出缺陷型(逐个检

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