参芪蛭龙汤联合雷公藤多苷片应用于MN模型大鼠保护作用的实验研究.docVIP

参芪蛭龙汤联合雷公藤多苷片应用于MN模型大鼠保护作用的实验研究 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：参芪蛭龙汤联合雷公藤多苷片应用于MN模型大鼠保护作用的实验研究 1 1、材料 2 2、方法 4 3、结果 6 4、讨论 8 文2：大黄素对脓毒症大鼠保护作用的实验研究 12 1 材料与方法 13 2 结果 14 3 讨论 15 参考文摘引言： 17 原创性声明（模板） 19 文章致谢（模板） 20 正文 参芪蛭龙汤联合雷公藤多苷片应用于MN模型大鼠保护作用的实验研究 文1：参芪蛭龙汤联合雷公藤多苷片应用于MN模型大鼠保护作用的实验研究 膜性肾病（MN）是临床上常见的肾小球疾病之一，多以肾病综合征的形式起病，根据发病原因可分为原发性膜性肾病（IMN）和继发性膜性肾病（SMN），其中IMN患者约占MN患者总数的75%[1]。研究表明，近年来MN的发生率逐年上升，可能与环境污染有关[2]。目前，MN的西医治疗以糖皮质激素联合免疫抑制剂为主，上述疗法虽有一定的疗效，但伴有明显的副作用（如股骨头坏死、高血压、糖尿病、严重感染、肝肾毒性等），且停药后容易复发[2，3] 参芪蛭龙汤是黑龙江省中医药科学院肾病科治疗MN的特色医院制剂，由党参、黄芪、当归、川芎等10味药材组成，临床使用十余年，疗效较好，具有一定的新药开发价值[3]。雷公藤为卫矛科雷公藤属木质藤本植物，具杀虫、消炎、解毒之功效[4，5]。雷公藤多苷是从雷公藤根木质部中提取所得的化合物[6]。现代药理研究表明，雷公藤多苷具有抑制免疫细胞活化、修复免疫复合物介导的足细胞损伤、减少蛋白尿的作用[7]。多项研究表明，以雷公藤多苷为主要成分的雷公藤多苷片具有较好的缓解蛋白尿的作用[8，9，10]；但该药具有骨髓抑制、肝功能损害、性腺抑制等副作用，使得其临床应用受到了限制[5，11]。本课题组在临床实践中发现，参芪蛭龙汤在缓解MN患者水肿等症状方面的效果较好，但在降低尿蛋白方面却起效较慢；雷公藤多苷片具有较好的降低尿蛋白作用，但存在明显的骨髓抑制；而二药联合应用后，既能明显降低MN患者尿蛋白水平，又能改善其水肿症状，同时雷公藤多苷片所致的骨髓抑制亦有所减轻。鉴于此，本研究通过建立MN大鼠模型，观察参芪蛭龙汤联合雷公藤多苷片对大鼠血常规、血糖、血脂、肝肾功能、尿蛋白、肾组织超微结构、乙酰肝素酶1(HPA-1）、转化生长因子β1(TGF-β1）等指标的影响，探讨参芪蛭龙汤对雷公藤多苷片的增效减毒作用及可能机制，旨在为临床联合用药提供理论依据。 1、材料 仪器 XS-500i型全自动血液分析仪[希森美康医用电子（上海）有限公司]；7600-020型全自动生化分析仪、H-7650型透射电子显微镜（日本Hitachi公司）；DM6B型荧光正置显微镜、RM2235型石蜡切片机（德国Leica公司）；KQ-600DE型超声仪（昆山市超声仪器有限公司）；H-2050R型超速冷冻离心机（湖南湘仪实验室仪器开发有限公司） 药品与试剂 参芪蛭龙汤组方药材党参、黄芪、当归、川芎、水蛭、地龙、僵蚕、虎杖、淫羊藿、凤尾草的饮片均由黑龙江中医药大学附属第一医院提供，经黑龙江中医药大学基础医学院田明教授鉴定均为真品。 雷公藤多苷片（浙江得恩德制药股份有限公司，批号：B，规格：10mg）；阳离子牛血清白蛋白（C-BSA）冻干粉（美国Chondrex公司，批号：190538）；不完全弗氏佐剂（美国Sigma公司，批号：SLBQ2284V）；白蛋白（ALB）、总蛋白（TP）、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、葡萄糖（GLU）、胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）测定试剂盒（中生北控生物科技股份有限公司，批号分别为171419、171341、183531、183537、183642、182011、167651、170641、170541、182661、171351）；微量总蛋白测定试剂盒[德赛诊断系统（上海）有限公司，批号：]；兔抗大鼠TGF-β1、HPA-1抗体（美国Affinity公司，批号分别为AF1027、AF6086）；辣根过氧化物酶（HRP）标记的山羊抗兔免疫球蛋白G(IgG）二抗（美国ThermoFishecientific公司，批号：31490）；山羊血清、二氨基联苯胺（DAB）显色液、苏木精染液、%Gluta固定液（电镜专用）（北京索莱宝科技有限公司，批号分别为、、、）；柠檬酸钠抗原修复液（北京碧云天科技有限公司，批号：）；磷酸盐缓冲液（PBS，，美国GEHealthcareLifeS