评价在胃癌中菱形结构域蛋白的表达（肿瘤学资料）.docVIP

评价在胃癌中菱形结构域蛋白的表达（肿瘤学资料） 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：评价在胃癌中菱形结构域蛋白的表达 1 1、资料与方法 2 2、结果 4 3、讨论 5 文2：胃癌中MMP9和RAB5A的表达 7 1 资料与方法 7 2 结果 8 3 讨论 9 参考文摘引言： 10 原创性声明（模板） 11 文章致谢（模板） 12 正文 评价在胃癌中菱形结构域蛋白的表达（肿瘤学资料） 文1：评价在胃癌中菱形结构域蛋白的表达 胃癌是常见的消化系统肿瘤，在全世界最常见的恶性肿瘤中位居第4位，且位居癌症死因的第2位[1]。早期胃癌(early gastric cancer， EGC)是指癌组织局限于胃黏膜层或黏膜下层，无论有无淋巴结转移。低级别上皮内瘤变(low-grade gastricintraepithelial neoplasia， LGIN)、高级别上皮内瘤变(high-gradegastric intraepithelial neoplasia，HGIN)是公认的癌前病变。进展期胃癌(advancedgastric cancer， AGC)的5年生存率不足20%，而EGC手术治疗预后良好，术后5年生存率可达90%以上[2，3]。由于EGC缺乏明显的临床症状，诊断率低，因此寻找相关分子标志物对EGC患者具有重要意义。 菱形结构域蛋白(rhomboiddomain-containing protein 1， RHBDD1)是2008年我国学者进行生精细胞基因差异表达筛选时发现的丝氨酸蛋白酶Rhomboid家族新成员[4]。前期研究结果已证明RHBDD1蛋白质具有膜内丝氨酸蛋白酶活性，能够通过切割底物包括促凋亡蛋白BIK、肿瘤抑制子活化通路蛋白TSAP6等发挥重要的生物学作用[5]。近期研究还发现RHBDD1与肿瘤发生密切相关，在结直肠癌和乳腺癌等多种肿瘤组织中高表达[6，7]。但目前尚无RHBDD1与胃癌之间关系的报道，本研究在慢性浅表性胃炎(chronic superficial gastritis， CSG)、胃癌前病变、EGC和AGC患者的胃黏膜组织中检测RHBDD1的表达，研究RHBDD1与胃癌发生发展的关系，并探究其是否有助于胃部疾病的良恶性鉴别诊断。 1、资料与方法 研究对象 回顾性收集2015年1月至2018年1月北京医院消化内科收治的胃部术后患者临床资料，包括手术治疗方式、病理诊断等，由两名病理科医生结合组织蜡块HE染色切片对病变组织病理学诊断结果重新进行独立判读。 纳入标准:(1)年龄≥18岁;(2)完成内镜黏膜下剥离术(endoscopicsubmucosal dissection，ESD)治疗或在普通外科接受手术治疗;(3)依据世界卫生组织消化系统肿瘤分类(2010版)[1]，术后病理明确诊断为胃癌、癌前病变或慢性浅表性胃炎，不论淋巴结转移与否，病变局限于黏膜层及黏膜下层定义为EGC，浸润超过黏膜下层为AGC。 排除标准:(1)病理资料不完整;(2)判读结果不一致;(3)伴发系统肿瘤疾病或癌前病变。 本研究已通过北京医院伦理委员会批准(审批号:2017BJYYEC- 085- 01) 样本量计算 本研究前期收集北京医院消化内科收治的胃癌以及慢性浅表性胃炎16例患者临床资料，对病变的组织病理学诊断结果进行重新判读。初步得到RHBDD1免疫组化得分对诊断胃癌的灵敏度(Sen)为82%，特异度(Spe)为75%，以显著性水平α=，允许误差δ=10%计算样本量，使用公式: n1=Z2*Sen*(1-Sen)/δ2=57 n2=Z2*Spe*(1-Spe)/δ2=72 n1n2，故以72为期望样本量，考虑到试验过程中样本损耗应适当增加纳入人数。 胃黏膜组织免疫组化染色及判读标准 ESD或手术切除胃组织放入中性甲醛溶液固定，每隔2 mm取材，经水洗、脱水、透明、浸蜡、包埋后制成蜡块，切成3μm的薄片。经过抗体染核，脱水，封片后在光学显微镜下观察切片，RHBDD1阳性着色于细胞质中，为棕黄色颗粒。免疫组化结果由两名病理科医生在光学显微镜下进行判读，随机选取5个高倍镜视野，得分取平均值计数。结果判读评价标准:(1)染色强度:即阳性染色细胞的平均强度，阴性=0，弱阳性=1，中等强度阳性=2，强阳性=3(图1);(2)阳性细胞百分比:即阳性染色的细胞数占视野内所有细胞的估计百分比，10%=0，10%～34%=1，35%～59%=2，60%～85%=3;(3)RHB-DD1免疫组化结果=染色强度得分+阳性细胞百分比得分(范围:0～6分)，RHBDD12分判为阴性，≥2分判为阳性[8]。二抗名称:兔超敏二步法(货号