探析耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的感染特点和耐药性情况（感染性疾病及传染病资料）.docVIP

探析耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的感染特点和耐药性情况（感染性疾病及传染病资料） 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：探析耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的感染特点和耐药性情况 1 1、材料与方法 2 2、结果 4 3、讨论 6 4、结论 8 文2：1例老年男性耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌尿路感染的治疗分析 8 参考文摘引言： 10 原创性声明（模板） 11 文章致谢（模板） 12 正文 探析耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的感染特点和耐药性情况（感染性疾病及传染病资料） 文1：探析耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的感染特点和耐药性情况 肺炎克雷伯菌是常见的机会性致病菌，占所有革兰阴性感染的1/3，其可致肠外感染，包括尿路感染、膀胱炎、肺炎、肝脓肿、内源性眼内炎、手术切口感染和危及生命的感染，如感染性心内膜炎和败血症[1]。肺炎克雷伯菌的耐药率正逐年上升。在过去的10年中，碳青霉烯类药物被认为是治疗耐药革兰阴性菌感染的最后一道防线。随着碳青霉烯类耐药菌株尤其是肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌检出率的快速上升，已成为当前临床抗感染治疗的难题。历年CHINET细菌耐药性监测数据显示，肺炎克雷伯菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别从2005年的％和％上升到了2017年的％和％，耐药率上升幅度达8倍，与此同时，肺炎克雷伯菌每年的分离率亦呈稳步上升趋势心[2]。碳青霉烯类抗菌药物是临床上治疗产超广谱B-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌引起的感染最有效的药物。产碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌(CPKP)是最重要的产碳青霉烯酶的肠杆菌科细菌(CPE)之一，并且已广泛传播到世界各地。[3-5]。碳青霉烯酶是引起碳青霉烯类耐药的最主要机制，包括A类(KPC)、B类(IMP、VIM、NDM)和D类(OXA-48)，且这些碳青霉烯酶基因大多位于质粒上。[3，6]。本研究主要了解本院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的药物敏感性和碳青霉烯酶基因携带情况，为医院合理用药和医院感染控制提供依据。 1、材料与方法 标本来源 收集本院2018年1月至2019年2月期问分离临床标本中非重复耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌95株。标准菌株：大肠埃希菌ATCC25922，肺炎克雷伯菌ATCCBAA-1705，肺炎克雷伯菌ATCCBAA-1706。 仪器与试剂 采用法国梅里埃Vitek2-Corn-pact全自动细菌鉴定仪鉴定细菌和药敏，K-B纸片法进行药敏试验复核(亚胺培南和美罗培南)，药敏纸片及MH培养基干粉均购自英国Oxiod公司。药敏结果采用CLSl2018标准进行判断，质控菌株为ATCC25922。 改良碳青霉烯灭活试验 mCIM 按照CLSIM100-$28方法操作，取1肚L接种环的生长于血琼脂平板上的过夜培养纯菌落，于2mLTSB肉汤中，震荡混匀10～15S。每管放入1张含美罗培南10弘g的无菌纸片，确认纸片浸没于菌悬液中，在(35±2)℃大气环境孵育(±)h。孵育结束时，立即用营养肉汤或％NaCl制备麦氏浊度的大肠埃希菌ATCC25922悬液，菌悬液制备和平板涂布必须15min内完成，干燥3～10min。用10肚L接种环将美罗培南纸片从TBS肉汤中取出，将纸片贴于试管内壁，轻轻按压以挤去纸片上多余水分，然后将纸片取出贴于已涂布有大肠埃希菌ATCC25922的MHA平板上，每个100mm的MHA平板最多贴4张纸片。倒置平板，(35±2)℃大气环境孵育18～24h，量取抑菌圈直径。结果判读：美罗培南抑菌圈直径为6～15mm或直径为16～18mm但抑菌圈内有散在菌落为碳青霉烯酶阳性；抑菌圈直径≥19mm为碳青霉烯酶阴性；抑菌圈直径为16～18mm或直径为≥19mm但抑菌国内有散在菌落为碳青霉烯酶中性。无法判断是否存在碳青霉烯酶。 eCIM 按照CLSIM100一$28方法操作。取第2支含TSB2mL的肉汤管，管壁上标记细菌名称，加入20肚/LEDTA溶液于2mLTSB中，EDTA最终浓度为5mmol/L。剩下步骤同mCIM实验步骤，mCIM和eCIM实验同步进行。mCIM和eCIM实验管中的美罗培南纸片贴于同一块已涂布有大肠埃希菌ATCC25922的MHA平板上。结果判读：与mCIM结果相比，美罗培南抑菌圈直径≥5mm为金属酶阳性，≤4mm为金属酶阴性。对于eCIM，忽略任何抑菌圈内的散在针尖样菌落，且仅当mCIM结果呈阳性时，eCIM结果才有效；mCIM结果阴性时，不解释eCIM结果。当mCIM结果阳性，eCIM结果阴性的情况下报告丝氨酸碳青霉烯酶阳性。 聚合酶链反应(PCR)方法 采用美国赛沛GeneXpert分子诊断系统，Xpert是实时荧光定量PCR快速检测，基于实时PCR技术，与配套的Xpert