糖类抗原19-9的检测方案设计.pdfVIP

糖类抗原 19-9的检测方案设计 1 临床病例 71 胡某某，女， 岁，因腹部胀痛就诊。入院腹部体格检查： 腹部膨隆，张力偏高，可见脐疝，上腹正中线处可见陈旧性竖行 手术疤痕，上腹部压痛， 无反跳痛，肝脾肋下未扪及，未扪及腹 部包块，墨菲氏征阴性，移动性浊音阳性，肠鸣音正常。目前诊 : 1. : ? 2. : ? 断考虑 腹水查因恶性肿瘤 其他 呕吐查因消化道肿瘤 肠梗 ? 阻 其他。患者现腹水原因不明，考虑恶性肿瘤可能，患者一般情 况差，无法耐受胃肠镜检查，导致诊断不明，治疗效果差，家属 表示知情，要求就地治疗，拒绝胃肠镜检查，现对该患者血清中 糖类抗原 19-9 的含量进行检测。 2 概述 糖类抗原 19-9(CA19-9)在人体组织中是以单唾液酸神经节苷 酯的形式存在的，在人血清中则是以富含糖链的高分子量糖蛋白 (即粘液素)的形式存在。已发表的研究显示，胰腺癌、结直肠癌、 胃癌及肝癌等各种胃肠恶性疾病的患者，血清中CA 19-9 检测值 通常会升高。但目前尚无资料支持CA 19-9 检测可用于恶性疾病 的筛查。CA 19-9 检测值持续升高可能和进展性的恶性疾病及治疗 反应不佳有关，检测值降低可能表示预后较好及治疗反应良好。 在转移性疾病和非恶性疾病 如肝炎、肝硬化、胰腺炎及其他胃肠( 疾病 的患者血清中，) CA19-9 检测值也会升高。因此CA19-9 不能 作为恶性肿瘤诊断和确诊的依据，也不能用于普通人的肿瘤筛查， CA19-9 主要用来对恶性肿瘤患者进行动态监测并辅助判断疾病进 程和治疗效果。 3 检测方法及检验原理 CA19-9 采用了化学发光微粒子免疫检测法，检验原理是两步 法免疫检测原理，该项目运用了Chemiflex 技术，将化学发光微粒 子免疫检测(CMIA)技术与灵活的检测模式相结合，对人体血清或 者血浆中的1116-NS-19-9 反应决定簇进行定量检测。 4 检验项目所需的器材 雅培i2000SR 分析仪、2k91糖类抗原 19-9 测定试剂盒、质控 品、校准品、样本稀释液、预激发液、激发液、浓缩清洗缓冲液、 反应杯、样品杯、移液管和吸头。 5 标本采集与处理 5.1患者准备 患者在进行标本采集前应配合医护人员在检验申请单或电子 申请表上提供自己的基本信息，以识别患者和经授权的申请者， 同时提供相关的临床信息。患者的基本信息至少包括姓名、性别、 年龄，用于解读检验结果。 5.2标本采集方法 静脉采血法。 5.3标本的处理过程中的注意事项 接受标本时应核对患者信息，观察标本外观、量，检查抗凝剂 或促凝剂的使用是否正确，检查标本的采集时间。合格的标本应 当符合：①最好使用真空采血系统、减少干扰、提高采血质量， 无外漏以保证生物安全；②采血量准确；③抗凝剂或促凝剂正确； ④标识清楚，具有唯一性，最好贴条形码等；⑤标本采集的日期 和时间明；⑤不能使用严重溶血样本和明显受微生物污染的样本； ⑥离心前，血清样本必须完全凝固。某些样本，特别是从使用了 抗凝剂或溶栓剂治疗的患者身上取得的样本，可能需要较长的时 间凝固。如果样本还没有完全凝固就离心，样本中的纤维蛋白可 能导致检测出的结果错误。 6 操作步骤 上机前需混合微粒子试剂让运输过程中沉淀的微粒子重新悬 浮。除了首次装载微粒子，之后都不需要进一步混合。 1 30 （）翻转试剂瓶 次以上。观察试剂瓶，检查微粒子是否能 重新悬浮。如果微粒子依然附着在瓶壁上，则需要继续翻转试剂 瓶，直到微粒子完全悬浮。如果不能重新悬浮，则不能使用。 2 （）微粒子重新悬浮后，给试剂瓶加盖软盖。参照说明书中 的试剂处理放置软盖到瓶口上后按需申请校准。 3 （）申请检测，然后检查所需试剂是否齐全，并确保所有试 剂瓶都有软盖。 4 19-9 80 （）第一次进行糖类抗原 检测时需要 μL 的样本