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新人教版生物选修1课题3《血红蛋白的提取和分离》
word学案
【课题目标】
本课题通过尝试对血液中血红蛋白的提取和分离,使学生能够体验从复杂体系中提取
生物大分子的差不多过程和方法,并了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的差不多原理,
为今后学习运用这些技术打下基础。
【课题重点与难点】
课题重点:凝胶色谱法的原理和方法。
课题难点:样品的预处理;色谱柱填料的处理和色谱柱的装填。
【导学诱思】
摸索1:分离生物大分子的差不多思路是什么?
摸索2:蛋白质的分离和提取的原理是什么?
摸索3: 高温灭菌和酒精灭菌分别利用蛋白质的何种作用,作用结果是什么被破坏?
摸索4:人们用鸡的红细胞提取DNA,用人的红细胞提取血红蛋白的缘故是什么?
一、基础知识:
㈠ 凝胶色谱法(分配色谱法):
1、概念:依照被分离蛋白质的 ,利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用,
来分离蛋白质的有效方法。
2、原理:当不同的蛋白质通过凝胶时,相对 的蛋白
质容易进入凝胶内部的通道,路程 ,移动速度 ,而
的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在 移动,路程 ,移
动速度 ,相对分子质量不同的蛋白质因此得以分离。
3、具体过程:
(1) (2) (3) (4) (5)
相对分子质
量较小的蛋
粒 凝
胶
颗
相对分子质
多
量较大的蛋 孔
板
A
B
A. 的蛋白质由于 作用进入凝胶颗粒内部而被滞留;
的蛋白质被排阻在凝胶颗粒别处,在了里之间迅速通过。
B. (1) 混合物上柱;
(2)洗脱开始, 的蛋白质扩散进入凝胶颗粒内;
的蛋白质被排阻于凝胶颗粒之外;
(3) 的蛋白质被滞留; 的蛋白质被向下移动。
(4) 不同的蛋白质分子完全分开;
(5) 的蛋白质行程较短,已从 中洗脱出来, 的
蛋白质还在行进中。
㈡ 缓冲溶液:
1、概念:在一定的范畴内,能对抗外来少量强酸、强碱或稍加稀释不引起溶液PH发生明显
变化的作用叫做缓冲作用,具有缓冲作用的溶液叫做缓冲溶液。
2、作用:能够抵制 的对溶液的 的阻碍,
坚持PH差不多不变。
3、缓冲溶液的配制
通常由 种缓冲剂溶解于水中配制而成。调剂缓冲剂的
就能够制
得 使用的缓冲液。
摸索:说出人体血液中缓冲对?
摸索:在血红蛋白整个实验室中用的缓冲液是什么?它的目的是什么?
使用的是磷酸缓冲液,目的是利用缓冲液模拟细胞内的PH环境,保证血红蛋白的正常
结构和功能,便于观看(红色)和材料的科学研究(活性)
㈢电泳:
1、概念:指 发生迁移的过程。
2、原理:许多重要的生物大分子,如 等都具有
在 下,这些基团会带上
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