实验室管理与风险评估3.pptVIP

实验设备管理与风险控制 ? 检验：仪器设备及操作 ? 风险： ? 系统存在泄漏点：出峰时间不稳定，样品响应值变化大，长期使用，仪器被腐蚀。 ? 色谱柱未按规定冲洗，或冲洗时间不够：导致色谱柱损坏或样品残留，影响下批产品分析。 ? HPLC、UV系统中进入气泡：柱压不稳，测试结果异常。 ? 水分测定仪漂移值异正常：影响测定结果。 * . 实验设备管理与风险控制 ? 检验：仪器设置及操作 ? 措施： ? 认真检查各连接点，保证各配件被正确安装。 ? 色谱柱按照操作规程进行冲洗，不用时保存于制定溶剂中。 ? 检查流动相量、比色池中样品量，应足够，已进气泡采取排气措施。 ? 检测水分测定仪各连接点，做好密封工作。 * . 实验微生物检测与风险控制 ? 风险：微生物/无菌检验 ? 风险： ? 环境洁净度：环境未达标，检验室环境污染导致测试结果阳性。 ? 人员对操作的污染。 ? 物品：消毒、灭菌措施未经验证，如灭菌釜温度过高，培养基被破坏，微生物没办法真实表达出来，造成假阴性结果。消毒、灭菌后存放条件不适合或放置时间过长造成污染。 * . 定量限 定量限体现了分析方法是否具备灵敏的测量检测能力。特别是杂质定量试验，需考察方法的定量限，以保证含量少的杂质能够被检测出。 1直观法 2、信噪比法 * . 定量限 考虑到仪器与仪器的误差，通常需要在几台仪器上确认定量限。 定量限要合适：通常应小于ICH报告限度（如：ICH报告限度的50%） 太高：表明方法灵敏度不够 太低：表明有其他小的降解产物。 为了保证HPLC系统在每次分析中都有足够的灵敏度的，需要将检测器灵敏度溶液作为系统适应性检查的一部分。检测器灵敏度大约为ICH报告限度的1/3,并与检测限一致，应该与基线可视分离。 * . 此外，定量限常常通过以下方法确定： --对已知被分析物浓度的样品进行分析，并确定该成分能够以可接受的准确度和精密度和精密度得到定量分析的最低浓度水平，以此来计算定量限。如果能够确定方法在定量限的精密度要求，则取5-6份被分析物含量递减的样品，进样6次。被分析物的含量范围从测得的已知LOD到LOD的20倍。 用计算得到的6次重复进样精密度的相对标准偏差（RSD）对被分析物含量作图。与预先规定的精密度要求相对应的含量即等于定量限。定量限试验中，重要的是不只是使用纯的标准物质，还应采用与未知样品相接近、并能代表未知样品的加标样品的加标基质。 * . 精密度 精密度一般用偏差、标准偏差或相对标准偏差表示。用标准偏差会相对标准偏差表示时，取样测定次数应至少6次。 精密度可以从三个层次考察：重复性、中间精密度、重现性。 * . 精密度—重复性 ?重复性测定可在规定范围内，至少用9次测定结果进行评价，如制备3个不同浓度的试样80%，100%和120%，每个浓度级别测定3次，或100%的浓度水平，用至少测定6次的结果进行评价。 * . 精密度—中间精密度 中间精密度通过比较同一实验室数日内各次检测的结果计算而得。 方法的中间精密度可以反映以下因素引起的结果差异： ?不同的操作人员 ?不一致的操作实际 ?不同的仪器 ?不同供应商的标准品和实际 ?不同批次的色谱柱 ?综合因素 中间精密度验证的目的是证实当方法开发阶段结果后，在同一个实验室内运用该方法能够得到相同的结果。 验证设计方案中的变动因素一般为日期、分析人员、设备。 * . 精密度—重现性 重现性的目的是证实方法在不同实验室运行能够能到相同的结果。 分析方法的重现性通过不同实验室的不同分析人员对均匀样品各部分分析的结果计算而得。通常操作人员和环境条件产生的偏离可能不同，但仍在所用的规定参数范围内。重现性的验证对于不同实验室使用的方法非常重要。 可能影响重现性的因素有房间温湿度的差异，或设备的特征参数不同（如HPLC系统的延迟时间不同），色谱柱的厂家或批号不同，以及操作人员的经验和想法不同。 * . 精密度 精密度接受标准 ?1.重复性 原料药方法验证时，API的RSD≤1.0%；制剂方法验证时，活性成分的RSD≤2.0%；杂质方法验证时，每个杂质的RSD≤20%。 ?2.中间精密度 原料药方法验证时，平行六份样品的RSD≤1