实验一水体初级生产力的测定.pptVIP

实验一：水体初级生产力的测定 水体初级生产力：指水生植物（主要是浮游植物）进行光合作用的强度。 第一页，共二十页。 Ⅰ 叶绿素a的测定 二、测定原理 叶绿素a是有机物，不溶于水，但能溶于丙酮、乙醇等有机溶剂。要用机械方法使细胞破碎，把叶绿素a从细胞中提取出来。 在测定过程中先用醋酸纤维滤膜抽滤水样，然后破碎细胞，用90%丙硐提取叶绿素a，再用分光光度计测叶绿素a的吸光度，最后利用公式计算叶绿素a的含量。 一、测定意义 1.是水中浮游植物生物量的指标 2.直接反映水体富营养化的程度 第二页，共二十页。 Ⅰ 叶绿素a的测定 三、测定方法和步骤 1.水样的采集与保存 求索溪：采样500mL； 莲心湖：300mL 2. 过滤水样：用真空抽滤装置，可添加0.2mLMgCO3悬液 3.提取：取出滤膜折叠→移入刻度离心管→加90%的丙酮至10mL→充分振荡，放入冰箱避光24h 第三页，共二十页。 Ⅰ 叶绿素a的测定 5. 测定吸光度：将上清液在分光光度计上，用1cm光程的比色皿，分别读取?750nm、663nm、645nm、630nm波长的吸光度，并以90%的丙酮作空白测定吸光度 4.离心：第二天取出离心管→3500r/min离心10min 第四页，共二十页。 Ⅰ 叶绿素a的测定 四、计算方法 叶绿素a= V--水样体积（L） V1--定容体积