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发酵液的预处理及回收.pptVIP

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转筒下部浸入滤浆槽中,浸没角约900-1300,圆筒缓慢旋转时(转速约/min),筒内每一空间相继与分配头中的3个室相通,可顺序进行过滤、洗涤、吸干、吹松、卸饼等项操作。即整个圆筒分为过滤区、洗涤及脱水区,卸渣及再生区3个区域。 转筒真空过滤机 优点: 转筒真空过滤机可吸滤、洗涤、卸饼、再生连续化操作,生产能力大,劳动强度小, 缺点: 辅助设备多,投资大, 且由于真空过滤,推动力小(不超过8×104 Pa),滤饼湿度大(20%~30%)。 主要适用霉菌发酵液,对菌体细小、黏度大铺助滤剂。对于滤饼阻力较大的物料适应能力较差。 (一)高价无机离子的去除方法 Ca2+ ——草酸、草酸钠,→形成草酸钙沉淀(注意回收草酸) ; Mg2+——三聚磷酸钠,→形成三聚磷酸钠镁可溶性络合物; Fe2+ ——黄血盐,→普鲁士兰沉淀 (二)杂蛋白的去除方法 沉淀法precipitation 变性法 Denaturation 吸附法 adsorption 1. 杂蛋白去除-沉淀法 precipitation A 等电点沉淀法 (isoelectric precipitation ) 蛋白质的等电点大都在酸性范围内~5.5),调节发酵液的pH到蛋白质的等电点是除去蛋白质的有效方法。 B. 酸碱调节,使蛋白质与离子形成沉淀 在酸性溶液中,蛋白质与一些阴离子形成沉淀,如三氯乙酸盐、水杨酸盐、苦味酸盐等; 在碱性溶液中,蛋白质与一些阳离子形成沉淀,如Ag+、Cu2+、Zn2+、Fe3+等。 2.杂蛋白去除-变性 Denaturation 蛋白质从有规则的排列变成不规则结构的过程称为变性。变性蛋白质溶解度较小。 加热, 大幅度调节pH值, 加酒精、丙酮等有机溶剂或表面活性剂等。 不足之处: 加热法只适合于对热较稳定的目的产物; 极端pH值也会导致某些目的产物失活,且要消耗大量酸碱; 有机溶剂法通常只适用于所处理的液体数量较少的场合。 2蛋白质变性例子 链霉素生产中,采用调pH至酸性(),加热至70℃,维持半个小时的方法来使蛋白变性,能使过滤速度增大10-100倍,滤液粘度可降低1/6。 柠檬酸发酵液,采用加热至80℃以上,使蛋白质变性凝固和降低发酵液粘度,从而大大提高了过滤速度。 3.杂蛋白去除- 吸附法 adsorption 加入某些吸附剂或沉淀剂吸附杂蛋白质而除去。 四环类抗生素生产中,采用黄血盐和硫酸锌的协同作用生成亚铁氰化锌钾K2Zn3[Fe(CN)5]2的胶状沉淀来吸附蛋白质,利用此法除蛋白质已取得很好的效果。 在枯草杆菌发酵液中,常加入氯化钙和磷酸氢二钠,这两者本身生成庞大的凝胶,把蛋白质、菌体及其它不溶性粒子吸附并包裹在其中而除去,从而加快了过滤速度。 2.2 固液分离 一 影响发酵液固液分离的因素 1)发酵液中悬浮粒子的大小 2)发酵液的黏度viscosity : 固液分离速度通常与粘度成反比,粘度越大,固液分离越困难。影响粘度的因素: 菌体的种类和浓度(重要因素),通常丝状菌、动物或植物细胞悬浮液粘度较大,浓度增大,粘度也提高。 培养液中蛋白质、核酸大量存在:通常细胞破碎或细胞自溶后粘度增大。因此细胞破碎的程度应控制,发酵放罐时间要适宜。 培养基成分:如用黄豆粉、花生粉作氮源,淀粉作碳源,粘度都会升高。 此外,某些染菌发酵液,如染细菌,则粘度会增大。 发酵过程的不正常处理,如大量过剩的培养基和消沫油加入,都会使粘度增大。 影响发酵液固液分离的因素 收集胞内产物的细胞或菌体,分离除去液相, 收集含生化物质的液相,分离除去固体悬浮物(细胞、菌体、细胞碎片、蛋白质的沉淀物和它们的絮凝体等)。 固液分离的目的包括两方面: 二 常见的固液分离方法 过滤 filtration 离心 Centrifugation 膜分离 membrane separation 双水相萃取 ATPS 扩张床吸附 EBA 2.2.1 过 滤 filtration 过滤操作是借助于过滤介质,在一定的压力差ΔP作用下,使悬浮液中的液体通过介质的孔道,而固体颗粒被截留在介质上,从而实现固液分离的单元操作。 过滤介质filter medium : 过滤采用的多孔物质; 滤浆filter pulp : 所处理的悬浮液; 滤液filtrate : 通过多孔通道的液体; 滤饼或滤渣 filter cake:被截留的固体物质。 滤饼过滤: 当悬浮液通过滤布时,固体颗粒被滤布阻拦而逐渐形成滤饼(滤渣)。 在滤饼过滤中,当滤饼至一定厚度时即起主要的过滤作用 适合于固体含量大于0.1%的悬浮液的过滤分离。 过滤推动力: 悬浮液自身压强差、重力 悬浮液的—外加压力 过滤介质的—抽真空 离心力 过滤阻力: 介质阻力:可视为不变,且一

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