罗氏试剂盒说明书 PTH.docVIP

12133091001V18 PTH 甲状旁腺激素试剂说明书 2009-08，V18 中文 PAGE 2 / NUMPAGES 7 Elecsys和cobas e 分析仪 100测试 本试剂盒适用的分析仪 Elecsys 2010 MODULAR ANALYTICS E170 cobas e 411 cobas e 601 ● ● ● ● 中文 主要用途 该免疫测定法适用于人血清和血浆中完整的甲状旁腺激素的体外定量检测，主要用于高钙血症和低钙血症的鉴别诊断。 Elecsys和cobas e免疫分析仪采用电化学发光免疫法（ECLIA）。 概述 甲状旁腺激素是由甲状旁腺分泌并释放入血的。完整的甲状旁腺激素由一条含84个氨基酸的多肽链组成，分子量约为9500道尔顿。其N端的生物学半衰期仅有几分钟。选择性甲状旁腺激素检测可直接用于判断甲状旁腺的分泌活性1,2。甲状旁腺激素、维生素D及降钙素，主要从骨骼系统中调动钙和磷，增加肠内钙的重吸收和肾脏对磷的排泄。血钙的水平是通过甲状旁腺激素和降钙素的相互作用而保持恒定的。在高钙血症的情况下甲状旁腺激素的分泌将会受到抑制，而在低钙血症的时候其分泌将会得到促进。 甲状旁腺功能紊乱会导致体内血钙水平的升高或者降低（高钙血症或者低钙血症）从而导致PTH的分泌发生变化。 检测甲状旁腺功能低下（甲状旁腺功能减低症）时，要求使用高敏感检测方法以能检测到低于正常值的PTH水平3,4。 甲状旁腺功能亢进往往导致PTH分泌增加（甲状旁腺功能亢进症）。原发甲状旁腺功能亢进症主要由甲状旁腺腺瘤引起。继发甲状腺功能亢进症时，血钙水平低是由其他病理因素造成的（如维生素D的缺乏）。 现在，PTH和钙的浓度的检测对评价甲状旁腺功能亢进症有重要意义。 甲状旁腺腺瘤的摘除术中对PTH的检测曾报道于原发型甲旁亢的情况5,6,7，肾衰竭导致的继发型甲旁亢8,9，以及与肾移植有关其它类型的甲旁亢10。由于PTH的半衰期仅为3-5分钟11，因此可以用来评价甲状旁腺外科切除术是否将患者功能亢进的甲状旁腺组织完全切除12。 美国国家临床生物化学学会（NACB）指南建议初始样本要在术前和疑似功能亢进腺体切除前采集13。切除术后5-10分钟内检测PTH，PTH水平比最高初始值降低＞50%作为手术成功的判断标准。可能还需要其他附加样本，因为敏感性随时间而增加14。PTH没有降低到推荐水平以下提示：1）存在残留亢进组织，可能还需进一步观察，就像一个病例中的两个患者，都有1/5甲状旁腺异位，需要再次手术7。2）腺瘤移除中PTH达到峰值15。所有的甲旁亢组织在手术中切除后，术中PTH检测可提供快速可靠的结果判断。 Elecsys电化学发光检测PTH的原理是双抗体夹心法，一个包被生物素的单克隆抗体与N端片段（1-37）反应，一个钌标记a的单克隆抗体与C端片段反应（38-84）。 该方法使用的抗体分别与26-32和37-42氨基酸肽段发生反应。 a)Tris(2,2’-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (Ru(bpy)2+ 检测原理 抗体夹心法，总检测时间：18分钟 第一次孵育：50μl样本、1个PTH的生物素化单克隆抗体和1个钌（Ru）标记的PTH单克隆抗体一起孵育，形成抗原抗体夹心复合物。 第二次孵育：加入包被链霉素的磁珠微粒进行孵育，通过生物素和链霉素的相互作用，复合物与磁珠结合。 将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面。未与磁珠结合的物质通过ProCell被去除。给电极加以一定的电压，使复合物化学发光，并通过光电倍增器测量发光强度。 仪器自动通过2点校正定标曲线计算获得检测结果，通过读取试剂条码获得标准曲线。 试剂－工作溶液 M Streptavidin-coated microparticles（透明瓶盖），1瓶，6.5ml：包被链霉素的磁珠微粒，0.72mg/ml；防腐剂。 R1 Anti-PTH-Ab~biotin（灰盖），1瓶7ml：生物素化抗PTH单克隆抗体（鼠），：2.3 mg/L;磷酸缓冲液100mmol/L，PH 7.0；防腐剂。 R2 Anti-PTH-Ab~Ru(bpy)32+ (（黑盖），1瓶10ml，钌标记PTH单克隆抗体（鼠），浓度分别为2.0 mg/L，磷酸缓冲液 100mmol/L，PH 7.0；防腐剂。 警告和注意事项 仅用于体外诊断。 在使用本试剂盒时必须遵循所有试验室试剂操作的注意事项。所有废弃物必需按照当地法规进行处置。 根据客户需要提供安全资料表。 避免试剂和样本（样本、