菊花的组织培养.pptVIP

课题1 菊花的组织培养 第一页，共三十七页。 通过必修课的学习，我们已经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么，有没有不用种子来培育植物的方法呢？ 组织培养 营养繁殖 扦插 嫁接 压条 第二页，共三十七页。 扦插 嫁接 压条 第三页，共三十七页。 植物组织培养是二十世纪发展起来的新技术，近三十年来由于组织培养基础理论研究的深入，发展极为迅速，发表的文献浩如烟海，几乎以植物为研究对象的各个分支学科都在广泛进行组织培养。 植物组织培养简介 第四页，共三十七页。 发展简史 1838-1839年，德国科学家Schleide 和Schwann发表了细胞学说，奠定了组织培养的理论基础。　　1902年，德国植物学家Haberlandt 根据细胞学说，提出单个细胞的植物细胞全能性（totipotency）理论。　　1904年，Hanning 最先成功地培养了萝卜和辣根菜的胚。　　1922年，Knudson 采用胚培养法获得大量兰花幼苗。　　1934年，White 用番茄根尖建立起第一个活跃生长的无性繁殖系，从而使非胚器官的培养首先获得成功。　　1958年，英国科学家Steward 等用胡萝卜根的愈伤组织细胞进行悬浮培养，成功诱导出胚状体并分化为完整的小植株，不但使细胞全能性理论得到证实，而且为组织培养的技术程序奠定了基础。 　　1962年，Murashinge 和Skoog 在烟草培养中筛选出至今仍被广泛使用的MS培养基。　　1964-1966年，印度科学家Guha 和Maheswari 在曼陀罗花药培养中首次由花粉诱导得到了单倍体植株。　　1972年，Carlson 通过两个种的烟草原生质体融合培养，获得了第一个体细胞杂交的杂种植株。…… 外植体灭菌与接种操作 第五页，共三十七页。 　　在人工培养基上，离体培养植物的器官、组织、细胞和原生质体，并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术。 组织培养 1、植物组织培养的原理是什么？ 植物细胞具有全能性，即生物体的细胞，具有使后代细胞形成完整个体的能力。 思考： 第六页，共三十七页。 植物组织培养过程示意图 2、上面的示意图中还有什么地方不够完善的？ 没有进行灭菌处理，试管也没有做密封等。 第七页，共三十七页。 3、结合录像外植体灭菌与接种操作，谈谈怎样预防组织　培养污染？ （一）防止外植体带菌 （二）保证培养基及接种器具彻底灭菌 （三）操作人员严格遵守无菌操作规程 （四）保证接种与培养环境清洁 第八页，共三十七页。 离体的植物器官、组织、细胞 脱分化 愈伤组织 再分化 根 芽 植物体 植物组织培养过程 植物组织培养条件 含有全部营养成分的培养基、一定的温度、空气、无菌环境、适合的PH、适时光照等。 第九页，共三十七页。 愈伤组织 第十页，共三十七页。 植物细胞全能性的表达 脱分化：将来自已分化组织的已停止分裂的细胞从植物体部分的抑制性影响下解脱出来，恢复细胞的分裂活性。 再分化:经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件下可有转变为各种不同细胞类型的能力。 第十一页，共三十七页。 MS固体培养基成分及比例 第十二页，共三十七页。 一、污染的定义 指在组织培养过程中，培养容器内滋生菌斑，使培养材料不能正常生长发育，从而导致培养失败的现象。 第十三页，共三十七页。 1、细菌污染：菌斑呈粘液状，界限比较明显，一般接种后1－2天即能发现。主要是大肠杆菌和链球菌 二、污染原因 第十四页，共三十七页。 2、真菌污染：菌斑呈绒毛状、絮状，界限不明显，伴有不同颜色的孢子接种后3－10天才能发现。主要是霉菌污染。 二、污染原因 第十五页，共三十七页。 正常苗 污染苗 第十六页，共三十七页。 1、外植体带菌 2、培养基及接种器具灭菌不彻底 3、接种操作时带入 4、环境不清洁 三、污染途径 第十七页，共三十七页。 四、污染的预防措施 （一）防止外植体带菌 （二）保证培养基及接种器具彻底灭菌 （三）操作人员严格遵守无菌操作规程 （四）保证接种与培养环境清洁 第十八页，共三十七页。 （一）防止外植体带菌 1、选择好外植体采集时期和采集部位 　 外植体采集以春秋为宜 优先选择地上部分作为外植体 阴雨天勿采，晴天下午采 采前喷杀虫剂、杀菌剂或套塑料袋 第十九页，共三十七页。 2、室内或无菌条件下进行预培养 （一）防止外植体带菌 第二十页，共三十七页。 3、外植体严格灭菌 灭菌效果试验 多次灭菌和交替灭菌 （一）防止外植体带菌 第二十一页，共三十七页。 （二）保证培养基及接种器具彻