体液蛋白质检验方法介绍.pptVIP

2. 双缩脲法 第三十一页，共四十六页。 + -HOH 甘氨酰甘氨酸 肽键 第三十二页，共四十六页。 第三十三页，共四十六页。 第八章 体液蛋白质检验 目标： 血浆中某些蛋白的功能及在疾病时的变化 蛋白质主要的检验方法 蛋白质检验的临床意义 第一页，共四十六页。 第一节 概述 一、血浆蛋白组成、功能及分类 二、个别血浆蛋白 三、疾病时血浆蛋白的变化 第二页，共四十六页。 一、血浆蛋白组成、功能及分类 功能： 营养作用 维持血浆胶体渗透压 维持血浆pH值 运输作用 免疫与防御 催化 代谢调控 凝血、抗凝血及纤溶作用 第三页，共四十六页。 分类： 盐析：白蛋白、球蛋白 醋酸纤维薄膜：白蛋白、a1-球蛋白、a2-球蛋白、b-球蛋白、g-球蛋白和纤维蛋白原 第四页，共四十六页。 第五页，共四十六页。 SDS电泳 第六页，共四十六页。 二维电泳 第七页，共四十六页。 功能分类： 载体蛋白： 前白蛋白，白蛋白，载脂蛋白，铜蓝蛋白，运铁蛋白，给合球蛋白，血红素结合蛋白，甲状腺素结合蛋白 免疫防御系统蛋白： IgG,IgM,IgD,IgE,IgA,补体系统 凝血和纤溶蛋白： 凝血因子7、8，凝血酶原，纤维蛋白原，纤溶酶原等 酶： 脂蛋白脂肪酶，卵磷脂-胆固醇酰基转移酶 蛋白酶抑制剂： a1-抗胰蛋白酶，a1-抗糜蛋白酶，a2-巨球蛋白 激素： 胰岛素，促红细胞生成素 参与炎症应答的蛋白： a1-酸性糖蛋白，C-反应蛋白 第八页，共四十六页。 蛋白质测定方法： 免疫化学法：利用特异性抗体 浊度测定、免疫扩散、免疫电泳、放射免疫、酶联免疫 电泳分离，观察图谱及半定量 化学方法：产生有色物质 第九页，共四十六页。 二、个别血浆蛋白质（来源、代谢、检验、临床意义） （一）前白蛋白： 半衰期短，因而营养不良及肝炎时降低早 功能：组织修复材料；运载甲状腺素、视黄醇 临床意义：营养不良、恶性肿瘤、肝硬化、肾炎时降低 第十页，共四十六页。 （二）白蛋白： 营养 胶体渗透压 运输 第十一页，共四十六页。 （三）a1-抗胰蛋白酶： 电泳：位于a1-球蛋白区带 功能:抑制多种蛋白酶。主要表现为抑制多形核白细胞吞噬作用后释放的弹性蛋白酶 临床意义：缺陷细菌多形核白细胞释放的弹性蛋白酶过度作用于弹性蛋白肺气肿 第十二页，共四十六页。 （四）a-酸性糖蛋白 急性时相反应蛋白—炎症时增高 第十三页，共四十六页。 （五）甲胎蛋白（AFP）： 胎儿时期产生的蛋白 肝癌：80%增高 胰腺癌、肺癌、肝硬化：增高 肝癌中15-20% AFP正常 胎儿产前诊断：高于正常时，易产生畸形 生殖细胞癌：AFP增高 第十四页，共四十六页。 （六）结合珠蛋白 与血红蛋白进行不可逆结合的糖蛋白 红细胞溶解自由血红蛋白与结合珠蛋白结合进入肝细胞降解（氨基酸、Fe再利用） 若红细胞破坏，引起血红蛋白释放增多，则结合珠蛋白减少 第十五页，共四十六页。 测定方法 电泳法 血浆中加过量血红蛋白与结合珠蛋白结合为复合物分离复合物测血红蛋白量表示结合珠蛋白量 测复合物的活性 免疫化学法 第十六页，共四十六页。 （七）a2-巨球蛋白 主要的蛋白酶抑制剂：包住蛋白酶，使不与蛋白结合 婴幼儿、儿童：高 雌激素：高（增加合成） 低蛋白血症：高 胰腺炎、前列腺癌：低 第十七页，共四十六页。 （八）铜蓝蛋白 主要功能：氧化还原作用多酚或多胺氧化 Fe2+Fe3+ 急性时相反应蛋白； 协助Wilson病的诊断：遗传病，铜代 谢障碍，铜蓝蛋白降低。 第十八页，共四十六页。 （九）转铁蛋白 结合铁、铜、锌等 急性时相（感染、组织坏死等）：降低 血管内溶血：降低 铁缺乏时：升高 第十九页，共四十六页。 （十）b2-微球蛋白 炎症、肿瘤、白血病、肾衰等：升高 第二十页，共四十六页。 （十一）C-反应蛋白 急性时相蛋白。心肌梗死、创伤、感染、手术、肿瘤浸润 结合细菌、真菌及原虫体内的多糖；结合卵磷脂、核酸 激活补体，引发调理作用，增强细胞吞噬功能，抑制血小板凝集和血块收缩 第二十一页，共四十六页。 二、疾病时的血浆蛋白质 机理：炎症损伤某些细胞因子信号转导系统 转录因子某些基因表达变化 （一）炎症、创伤： 前白蛋白、白蛋白、转铁蛋白：下降 其它： 升高 第二十二页，共四十六页。 第二十三页，共四十六页。 肝巨噬细胞（枯否细胞（Kupffe