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《临床微生物学检验技术》课程实验教学大纲 课程编号 课程名称：临床微生物学检验技术 适用专业：医学检验技术 课程类别：必修 开课学期：第五学期 实验学时： 48 学 分：5 一、开课实验室 医学影像与检验实验室 二、课程性质与任务 课程性质：《临床微生物学检验技术》是一门将实验室科学和临床医学相结合的学科，是研究病原微生物的生物学特性、致病性、微生物检验与防治原则的学科，是医学检验技术专业的一门主干课和专业课。 课程任务：通过系统学习研究感染性疾病的病原体特征，寻找快速、准确的感染性疾病病原学诊断方法与策略，培养学生的临床思维能力及熟练的动手操作能力，使学生具有扎实的基础理论和临床实践技能，为以后从事科研工作及临床检验工作下坚实基础。 三、教学目的和要求 1.掌握常用微生物学技术和微生物学检验方法的原理、操作、结果判定、质量控制及方法学评价。 2.熟悉应用临床思维分析能力对感染性疾病的诊断预防及治疗提出专业的见解。 3.提高学生的动手能力，对微生物学检验技术常用的实验操作方法与常用仪器能熟练操作。 四、考核形式要求 实验成绩100分记，实验考核占总成绩20%。 五、实验项目名称与学时分配 序号 实验项目名称 实验类型 实验学时 每组人数 实验要求 (必做或选做) 1 细菌检验基本技术（一） 验证 4 12 必做 2 细菌检验基本技术（二） 验证 4 12 必做 3 抗菌药物敏感试验 及细菌生化反应接种 验证 4 12 必做 4 细菌常用生化反应 验证 4 12 必做 5 血液标本的细菌学检验 综合 4 12 必做 6 尿液标本的细菌学检验 综合 4 12 必做 7 粪便标本的细菌学检验 设计 4 12 必做 8 脓汁标本的细菌学检验 综合 4 12 必做 9 下呼吸道标本的细菌学检验 综合 4 12 必做 10 院内感染的监测 综合 4 12 必做 11 真菌试验 验证 4 12 必做 12 实验考核 综合 4 12 必做 实验项目的具体内容 实验一 细菌检验基本技术（一） 1、实验目的和要求 （1）掌握高压蒸汽灭菌技术； （2）掌握常用的液体、固体、半固体培养基的配制； （3）熟悉临床微生物学与检验教学实验室规则； （4）熟悉临床微生物实验常用器材的处理,包裹及灭菌方法。 2、材料试剂 高压灭菌器、烧瓶、蛋白胨、牛肉膏等 3、实验内容 临床微生物学与检验教学实验室规则（见临床微生物学与检验实验指导）： 实验室意外应急处理措施（见临床微生物学与检验实验指导）： 常用器材的处理： 高压蒸汽灭菌器的使用： 培养基制备的基本过程： 常用培养基的制备： 肉膏汤配方：1000ml蒸馏水+ 牛肉膏3g +蛋白胨10g+NaCl 5g 4、教学方式 老师讲解、示教 + 学生互相操作，老师指导 5、考核要求 随机抽查二组学生，检查操作的准确性并纠正操作中的错误。 6、实验报告要求 要求书写实验目的、实验器材、实验内容、检查结果、实验结论。 实验二 细菌检验基本技术(二) 1、实验目的和要求 （1）掌握平板划线、斜面、液体和半固体培养基等各种接种方法; （2）熟悉常用细菌接种用具、接种细菌的环境要求和无菌操作要领; （3）掌握革兰染色法原理、操作步骤及临床意义； （4）掌握细菌涂片的制备。 2、材料试剂 接种环、接种针、酒精灯、固体平板、斜面、液体培养基、半固体培养基、革兰染液、大肠埃希菌，葡萄球菌 3、实验内容 细菌分离培养与接种技术：固体平板划线接种法；斜面接种法；液体接种法； 半固体穿刺接种法。 革兰染色法：实验原理；实验步骤；实验结果。 4、教学方式 老师讲解、示教 + 学生互相操作，老师指导 5、考核要求 随机抽查二组学生，检查操作的准确性并纠正操作中的错误。 6、实验报告要求 要求书写实验目的、实验器材、实验内容、检查结果、实验结论。 实验三 抗菌药物敏感试验（K-B扩散法） 及细菌生化反应接种 1、实验目的和要求 掌握K-B纸片扩散法的原理、操作方法、结果判读及其临床意义 2、实验原理 将含有定量抗菌药物的纸片（药敏纸片）贴在已接种待测菌的琼脂平板表面特定部位，该点称为抗菌药源。药物借其分子的扩散力向周围琼脂中扩散，形成了随着与药源距离加大，琼脂中药物浓度逐渐减少的梯度浓度。其药源周围一定区域的琼脂内药物浓度高于抑制该待测菌所需浓度时，则该区域内细菌不能生长，形成透明抑菌圈。抑菌圈的大小可以反映待测菌对该测定物的敏感程度，并与该药对待测菌的最低抑菌浓度（MIC）呈负相关，即抑菌圈越大，MIC越小。 3、材料试剂 金黄色葡萄球菌菌液、大肠埃希菌菌液、无菌棉签、镊子、接种环、刻度尺、0.5麦氏单位比浊管、抗菌纸片、水解