药典附录无菌检查和微生物限度检查法增修订内容.pptVIP

⒌固体培养基灭菌后的再融化应在加热的水浴中或采用流通蒸汽进行，只允许一次，融化的培养基应放在45～50℃的水浴中，不得超过8小时。 ⒍使用过的培养基（包括失效的培养基）应按照国家污染废物处理相关规定进行。 第三十页，共五十二页。 菌种 实验室菌种的处理和保藏的程序应标准化， ⑴使尽可能减少菌种污染和生长特性的改变。 ⑵按统一操作程序制备的菌株是微生物试验结果一致性的重要保证。 第三十一页，共五十二页。 菌种保藏的原则 ⑴标准储备菌株可用于制备每月或每周一次转种的工作菌株.冷冻菌株一旦解冻转种制备工作菌株后,不得重新冷冻或再次使用。 ⑵工作菌株不可代替标准菌株，标准菌株的商业衍生物仅可用作工作菌株。 第三十二页，共五十二页。 菌种的传代和使用 ⑴工作菌种的传代次数应严格控制，不得超过5代防止过度的传代造成菌种变异,工作菌株不可代替标准菌株. ⑵任何亚培养的形式均被认为是转种或传代一次。实验室应对工作菌株的特性和纯度进行确认。 第三十三页，共五十二页。 第三十四页，共五十二页。 第三十五页，共五十二页。 第三十六页，共五十二页。 第三十七页，共五十二页。 　中国.中学政治教学网崇尚互联共享 2010年版药典附录无菌检查和微生物限度检查方法增修定内容 第一页，共五十二页。 起草的指导思想 一、以科学发展观为统领，服务于资源节约型社会、环境友好型社会的要求；落实科学监管理念，着力解决发展中的问题。 二、与时俱进，广泛吸纳先进技术与成果；坚持自主与创新；积极推进药品标准化战略，提高我国药品标准总体水平，着力提升《中国药典》在国际社会中的地位和作用，提高综合竞争力，促进医药产业的健康发展，为构建社会主义和谐社会作出贡献。 第二页，共五十二页。 2010年版无菌检查法增修订内容 一、进一步确定了无菌检查法的定义：无菌检查法系用于检查要求无菌的药品、医疗器具、原料、辅料、及其他品种是否无菌的一种方法。 二、进一步明确了无菌检查保障 1、检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染，但采用的措施不得影响微生物的生长。 2、无菌检查要进行环境检测增加了日常检验还需进行环境检测。 3、无菌检查人员必须具备微生物专业知识，并经过无菌技术的培训。 第三页，共五十二页。 无菌检查仪器 无菌检查仪 无菌滤杯 第四页，共五十二页。 三、培养基增修订内容 ⒈删去硫乙醇酸盐流体培养基和改良马丁培养基的使用范围。 ⒉删去选择性培养基使用的表面活性剂种类对氨基苯甲酸、聚山梨酯-80等 第五页，共五十二页。 培养基适用性检查增修订内容 3、培养基灵敏度试验⑴菌悬液制备中黑曲霉菌悬液的制备修改为“用适宜的方法吸出孢子悬液”。⑵在稀释液0.9%无菌氯化钠溶液中加入0.05％v/v）聚山梨酯80。 第六页，共五十二页。 四、试验稀释液、冲洗液增修订为 ⒈增加根据供试品的特性，可选用其他经验证过的适宜的溶液作为稀释液、冲洗液。 ⒉试验中使用的中和剂、灭活剂和表面活 性剂除证明其有效性外还应证明对污染的微生物无影响修改为无毒性。 第七页，共五十二页。 五、方法验证试验增修订内容 ⒈试验菌株删除铜绿假单胞菌增加大肠埃希菌及大肠埃希菌菌液的制备(同金黄色葡萄球菌)。 ⒉薄膜过滤法供试品用量将规定量供试品按薄膜过滤法过滤修改为取每种培养基规定接种的供试品总量。 第八页，共五十二页。 六、供试品的无菌检查增修订内容 ⒈检验量 直接接种法除另有规定外，每份培养基接种的供试品量按表2、表3规定删除，采用直接接种法时的规定。 2.阴性对照 无菌试验中若使用表面活性剂等应证明其有效性且对微生物生长无影响修改为无毒性。 第九页，共五十二页。 ⒊薄膜过滤法 ①增加了抗生素供试品滤膜选择的指导应选择低吸附的滤器及滤膜。 ②若需要冲洗滤膜,每张滤膜每次冲洗量一般为100ml，且冲洗量不宜过大修改为总冲洗量不得超过1000ml 。 ⑴水溶液供试品 含抑菌成分需用适量的冲洗液冲洗膜修改为所用的冲洗量、冲洗方法同方法验证试验. 第十页，共五十二页。 微生物限度检查增修定内容 修改内容 1、培养条件控制菌培养温度35℃～37℃修改为30℃～35℃。 限度检查（薄膜过滤仪器） 第十一页，共五十二页。 2、检验量增修订内容 ⑴中药膜剂检验量50 cm2修改为100cm2。 ⑵沙门菌检验量修改为检验量为20 g或20ml并注明（其中10 g用于阳性对照）。 第十二页，共五十二页。 3、供试液的制备增修订内容 ⑴供试品检查时使用表面活性剂应证明其对微生物生长和存活无影响修改为无毒性。 ⑵供试液的制备若需加温时，可采用