《基础毒理学》课件-靶器官毒理学.pptVIP

* * 肝毒性机制的研究 灌流肝脏 可以在没有其他系统的影响下，进行不同难度水平的观察。 细胞模型 能够用于证明某种细胞的作用及不同类型细胞间的相互作用。 整体动物模型 对损伤进展和慢性损伤反应的评价是很重要的。 基因转染或表达 能够解决一部分问题。 基因敲除 能够为研究复杂的肝毒性提供非常有用的模型。 * * 1.摄取和浓缩 亲脂性药物和环境污染物很容易分布到肝细胞中 （摄取对肝脏的损伤）。 富含生物膜的肝脏可浓缩亲脂性物质，作为窦状隙转运体的底物，其他的毒性物质能快速地从血中分离出来（浓缩使毒性物质很容易对肝脏造成损伤）， * * 2.生物活化和减毒 肝细胞的I相酶能将外源性物质转化为活性亲电代谢产物。 肝细胞Ⅱ相酶可为分子添加极性基团，这有助于后者从体内消除。 Ⅱ相酶的反应常产生稳定的、无活性的代谢产物。 一般而言，在I相酶和Ⅱ相酶作用之间的平衡决定了一种活性代谢产物是否会激发肝细胞损伤或安全解毒。 * * 3.窦状腺细胞活化 长期和短暂暴露于化学物质（如：乙醇）中可直接或间接地影响窦状隙细胞。 其原因是由于窦状腺细胞的活化 * * 4.炎症和免疫应答 中性粒细胞、淋巴细胞和其他炎症细胞迁移至已受损的肝脏部位是许多化学物质导致肝毒性的识别特征。 在反复暴露于化学物质(通常是药物)导致的肝毒性中，偶尔可观测到免疫应答反应。 免疫应答只见于乙醇、氟烷和其他几种肝毒性物质。 * * 二 肝毒物的毒性评价 整体动物试验 肝损害的形态学评价 大体解剖 光学显微镜检查 电子显微镜检查 免疫组化 肝损害的功能学评价 血清酶学方法 肝脏排泄功能 肝组织化学成分的改变 ■肝损害的体外试验及评价 ◆离体灌流肝匀浆试验 ◆肝薄片孵育试验 ◆原代肝细胞培养试验 * * 血清酶学方法 根据肝脏损害的特异性和敏感性的不同，将血清酶分为三组 第一组，主要包括碱性磷酸酶（AP）、5’-核苷酸酶（5’-NT）和γ-谷氨酸转肽酶（γ-GT）； 第二组，天冬氨酸转移酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、鸟氨酸氨基甲酰转移酶（OCT）、山梨糖醇脱氢酶（SDH）； 第三组，磷酸肌酸激酶（CPK）和胆碱酯酶（ChE）。 * * 肝脏排泄功能 化学物可以原形或代谢产物经肝脏排泄，经胆汁排泄的化合物根据排泄时所测得的胆汁/血浆浓度比值被划分为三类： ①A类物质包括钠离子、钾离子、氯离子以及葡萄糖，其比值大约为1.0（≈）； ②B类物质如胆盐、胆红素、BSP和许多外源物，其比值大于1.0（＞）； ③C类物质为一些大分子，如菊粉、磷脂、粘蛋白和白蛋白，其比值小于1.0（＜）。 * * 肝组织化学成分的改变 包括肝脂质含量 脂质过氧化产物 蛋白质合成 DNA合成 DNA复制 活性代谢产物的测定 * * 肝损害的体外试验及评价 主要有以下四方面： 离体灌流 肝匀浆试验 肝薄片孵育试验 原代肝细胞培养试验 * * 离体灌流 离体灌流肝实验是介于体内与体外实验之间的实验。 它运用体外肝灌流技术，在保持肝组织结构完整的情况下，研究毒物对肝生物合成功能、物质代谢、转运与排泄等过程的影响。 * * 肝匀浆试验 常用于毒物代谢、蛋白合成能力及脂质过氧化作用的研究，但是该试验有一定的缺点，主要是失去了正常存在的细胞内各细胞器之间的生理调节。 * * 肝薄片孵育试验 大鼠的肝薄片试验被用来观察毒物对大鼠u肝细胞的损伤和对脂质分泌功能的抑制作用。 * * 原代肝细胞培养试验 分离大鼠的肝细胞，进行常规培养，细胞在培养一段时间后，细胞的形态和数量达到试验要求时即可用于检测化学物对肝细胞的毒性研究。 * * 三 肝脏毒性生物标志物 分类 肝细胞损害标志物 * * （一）肝脏毒性生物标志物的分类 按反映的意义肝脏毒性生物标志物可分为以下五大类 ： 反映肝细胞损害的标志物 反映肝脏分泌和排泄功能的标志物 反映肝脏合成功能的标志物 反映肝脏代谢转化能力的标志物 反映肝脏纤维化和硬化的标志物 * * 反映肝细胞损害的标志物 血清丙氨酸氨基转移酶 天冬氨酸氨基转移酶 腺苷脱氨酶 谷胱甘肽-S-转移酶 乳酸脱氢酶 谷氨酸脱氢酶 精氨酰琥珀酸裂解酶 异柠檬酸脱氢酶 山梨醇脱氢酶 醛缩酶等 * * 反映肝脏分泌和排泄功能的标志物 血清胆红素 血清总胆汁酸 吲哚氰绿滞留率 * * 第二节 免 疫 毒 性 * * 免疫毒理学的概念 免疫毒理学（immunotoxico1ogy）主要研究物理、化学和生物因素对机体免疫系统的有害作用及其机制的一门学科。 * * 免疫系统基础知识 免疫系统包括 免疫器官 免疫细胞 功能相互关联 免疫分子 * * 机体免疫系统 * * 免疫器官、免疫细胞、免疫分子 免疫器官主要由淋巴