真菌多糖的发酵制药.pptx

真菌多糖的发酵制药 真菌多糖 定义：指各种真菌的子实体和菌丝体所产生的一类代谢产物，具有某种独特生理活性的多糖化合物，包括酵母菌多糖、霉菌多糖、真核藻类多糖和大型真菌多糖等等。分类： 1）结构多糖 2）活性多糖生理功能：真菌多糖被称为称为“生物反应调节物”，简称“BRM”，经研究表明，多糖具有生物反应调节物的特征，可做为免疫增强剂和免疫激活剂，具有提高人体免疫功能、抗肿瘤、抗突变、抗衰老、降血糖、降血脂、预防糖尿病、抗菌和抗病等特殊生理功能。真菌活性多糖、真菌活性多糖的结构及生理功能二、真菌活性多糖的制备工艺真菌活性多糖的制备工艺原料有两种来源 子实体液体深层发酵法 子实体多糖 菌丝体 发酵液 菌丝体多糖 发酵液多糖 （胞内多糖） （胞外多糖） （一）真菌多糖深层发酵法 1．原理 2．设备 3．工艺流程 真菌液体深层发酵工艺流程 操作注意： 1）摇瓶种子在室温下振荡培养4~6d后，经无菌检验以 2%~5%的接种量接入种子罐中，发酵过程对无菌操作要求很高。 2） 发酵前期 通风比为1:0.5，中后期调至1:1。 3） 培养过程 采用搅拌方式。4．工艺说明（1）菌种： 菌种培育→斜面或沙土管孢子低温保藏→复壮→分离纯化 （2）培养基 ： ①孢子培养基：提供菌体的生长繁殖，形成孢子。 ②斜面/液体种子培养基：供孢子发芽、生长和繁殖菌丝体，并使菌体长得粗壮， 成为活力强的“种子”。 ③发酵培养基：供菌种生长、繁殖和合成产物（3）种子制备（种子扩大培养） ①斜面活化：使保藏的生产菌种恢复活力 ②摇瓶培养：种龄要控制在对数期 ③种子罐扩大培养：一般不要超过三级 （4）发酵罐：通风式发酵罐 （5）发酵过程工艺控制： ①温度、pH控制：最适生长温度和pH并非一定是最适产物形成温度和pH ②压力控制：正压发酵 ，保证纯种的培养 ③溶解氧控制：通过通气和搅拌实现。搅拌转速，通气量 发酵前期小、中期大、后期小 ④泡沫控制：食用级消泡剂 如泡敌 ⑤中间补料：真菌多糖的形成一般在减速期和稳定期，故在此时期内可连续或多次补料(一般为碳源) ⑥染菌控制：无菌操作 ，设备密封性能 检查，染菌检查 （6）发酵终点判断： 何时放罐要根据发酵目的、经济等因素综合考虑 。 以菌丝形态、数量以及养分的消耗和代谢的变化作为指标。 （二）真菌活性多糖提取纯化工艺 1．原理：热水或极性溶剂浸提 →分离纯化 →胞内外多糖产品 2．设备 3．工艺流程 4．工艺说明 （1）原料及预处理： （2）提取溶剂及浸提条件的选择：水或0.5mol/L NaOH溶液。浸提温度不宜过高，以免多糖降解或结构发生变化。 （3）浸提液固液分离：若用热碱浸提，则浸提液用HCl中和至中性。 （4）浓缩上清液：热浓缩、超滤浓缩 （5）醇析：4℃冷乙醇至终浓度70％，充分沉淀活性多糖 （6）脱脂、除蛋白：用无水乙醇、丙酮脱脂，再用Sevag法脱除杂蛋白。 灵芝多糖口服液生产工艺 灵芝纯多糖→调配→均质→过滤→灌封→杀菌→成品