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磷酸化酶活性的测定 磷酸化酶 （Phosphorylase，EC2.4.1.1）广泛存在于动植物和微生物中，它催化下列反应： （葡萄糖）+无机磷→ （葡萄糖） ＋葡萄糖-1-磷酸 n n-1 反应在离体条件下是可逆的。但一般认为在植物质体中，磷酸化酶实际上只催化淀粉的水解，因 为反应底物无机磷浓度比葡萄糖-1-磷酸几乎高了两个数量级。动物来源的磷酸化酶已被详细地 研究，发现此酶具有一个涉及磷酸化修饰和聚合态变化的复杂调节模式：钝化的四聚体酶 （b） 和活化的磷酸化的二聚体酶（a）在蛋白激酶和效应剂的作用下互相转化。此酶亚基分子量在 100 kD左右，每个亚基结合一个磷酸吡哆醛。磷酸化酶在微生物 （如酵母）和植物 （如马铃薯）中 也有较多的研究。许多植物中此酶有不少同工酶存在，一般最适 pH偏酸性，pH5.8左右；在碱 性情况下此酶较不稳定。磷酸化酶的活性测定方法有许多种：测定淀粉或糖元合成方向的方法有 14 无机磷释放定量分析法、C标记的葡萄糖-1-磷酸掺入淀粉和糖原的同位素测定法；测定淀粉或 32 糖原分解方向的方法有 P ，掺入葡萄糖-1-磷酸的同位素测定法和偶联测定法。考虑到实验的简i 便性，我们这里主要介绍无机磷