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荧光分光光度法测定吲哚乙酸 生长素具有促进细胞伸长、抑制脱落、促进插枝生根、增强顶端优势等多种生理功能。吲哚 乙酸 （IAA）是目前发现的最主要的植物内源生长素。内源IAA 的含量可用荧光分光光度法测 定。在催化剂的作用下，1AA 可以与乙酸酐反应，生成2-甲基吲哚-α-吡喃酮，该化合物可产生 482 nm 的荧光。虽然少数已知的吲哚化合物也能与乙酸酐反应，生成相应的吡喃酮，但是，这些吡 喃酮化合物在 482nm 处发出的荧光极其微弱，不足以影响 IAA 的测定。由此可见，荧光分光 光度法测定吲哚乙酸专一性很强。 荧光分光光度法测定IAA 的灵敏度很高，IAA 总量为1ng 时即能测定。由于IAA 样品不需 经过复杂的纯化过程，所以与其它理化方法相比，荧光分光光度法的操作程序较为简单。 1.仪器设备 高分辨率、高灵敏度荧光分光光度计 （分辨率要求：能很好地分辨482nm 荧光与440nm 的 瑞利散射光谱及520nm 的水的朗曼散射光谱；灵敏度要求：朗曼散射光谱最大信号峰可达记录 仪满度的10%~20%。如Perkin Elmer 公司的MPF-3L 型）、液体闪烁计数仪、薄膜旋转蒸发器、 低温冰箱、pH 计、分液漏斗、布氏漏斗、研钵等。 2.操作方法 1）IAA 的提取：取新鲜植物组织1~5g