酰胺氮（谷酰胺、天冬酰胺和酰胺总量）的测定.pdfVIP

酰胺氮 （谷酰胺、天冬酰胺和酰胺总量）的测定 酰胺是植物体内氨的重要贮存形式。它有解除氨（包括植物由外界吸收和吸收其它形式的氦 后同化供给合成蛋白质和其他氮化物的氨，植物体内蛋白质和其他氮化物分解形成的氨，以及豆 科植物根瘤菌共生体固定氮后形成的氨等）对植物毒害的功能，在植物氯代谢中起十分重要的作 用。因此常被用作为植物氮代谢研究中的生化指标。 1.仪器设备 凯氏定氮用烧瓶、回流冷凝器、测氨所需器皿。 2.操作方法 1）材料可用去除蛋白质氮或在系统测定中分馏去其他形态氮后的植物样品。取50ml 样品 放入凯氏瓶中，加入浓硫酸 （至5%浓度），在回流冷凝器下煮沸3h。冷却时以NaOH 中和至微 碱性。然后以测氨方法测定。所测得的氨量为酰胺分解生成的氨与存在于提取液中的氨之和。从 所测得的氨量中减去先已测得的氨量，即为酰胺中氨量。以之乘以9.42，即为天冬酰胺的含量， 而乘以10.42 则为谷酰胺的含量。 2）谷酰胺和天冬酰胺的分别测定：利用2 种酰胺的水解性不同将它们分开，然后分别测定。 一般在 pH6.4～6.8 的沸水浴中，1h 内100%酰胺水解成酰胺和氨，而天冬酰胺仅有2.5%分解， 它只有在加入5%硫酸并于沸水浴中水解3h 后才能完全分解。测定时，取200ml 样品液，加入 5～10m