吲哚生物碱含量的测定.pdfVIP

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  • 2023-03-08 发布于上海
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吲哚生物碱含量的测定 1.仪器设备 高压液相色谱仪 (HPLC)、荧光检测器、离心机、研钵、pH 计、C 预处理柱、注射器等。 18 2.操作方法 1)提取:叶片或培养细胞加入5倍体积的0.01%醋酸,用研钵仔细研磨,匀浆用纱布过滤后离 心,4200×g 离心5min。上清液用NaOH 调pH 至7.3~7.5 (只测定阿玛碱可不调节pH),通过 C 预处理柱,生物碱吸附在柱上。先用30ml 甲醇:5mmol/L (NH )HPO 1:9 (v/v,pH7.3) 18 4 2 4 除去杂质,再用2~3ml 甲醇:25mmol/LNH H PO 85:15 (v/v,pH4.7)冲下生物碱,收集 4 2 4 于样品管中。 2)含量测定:样品用HPLC 系统定量检测,荧光检测器设置在所测生物碱的最大激发和发射波 长,阿玛碱:Ex:284nm,Em:365nm;蛇根碱:Ex:308nm,Em:363nm。用C 柱 (10 μm,

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