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转氨酶 （GOT 和GPT）的提取和活性测定 氨基酸分子上的氨基转移到α-酮酸分子上的反应，称转氨反应，由转氨酶催化。谷氨酸-草 酰乙酸转氨酶 （GOT）和谷氨酸-丙酮酸转氨酶 （GPT）是两种最普遍的转氨酶。 GOT 能催化如下反应： 此反应可与苹果酸脱氢酶相偶联从而用来测量该酶的活性。 测定NADH 在340nm 或366nm 处的吸光度的变化，即可计算转氨酶的活性。GOT 活性还 可以用比色法测量。用柠檬酸苯胺作催化剂，使草酰乙酸定量地转化为丙酮酸。再进而转化为丙 酮酸的2，4-二硝基苯腙，然后在450nm 处进行测量。 GPT 能催化如下反应： + 联，生成的丙酮酸转化为乳酸，NADH 成NAD 。测量340nm 处NADH 的吸光度即可计算 GPT 酶的活性。 GPT 活性也可通过丙酮酸与2，4-二硝基苯肼反应进行比色法测量，但应选用500～550nm 波长，以便使a-酮戊二酸腙所生成的色度减少到最低限度。 1.仪器设备 搅拌器、高速离心机、紫外分光光度计等。 2.操作方法 1）酶粗提液的制备：植物材料放到0.25体积的0.05mol/LTris-HCl 缓冲