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第十二章螺旋体支原体衣原体立克次体鉴定;第十二章
螺旋体、支原体、衣原体、立克次体鉴定 ;;学习目标及重点;第一节 螺旋体;2、培养特性
生长缓慢,常用含10%兔血清得柯氏(Korthof)培养基培养
在液体培养基中,28℃培养1周左右,肉眼可见半透明云雾状混浊
固体培养基上,28℃培养2周左右,可形成透明、不规则得扁平菌落
非致病菌株13℃可生长,以此可鉴别致病株
3、抗原构造 钩端螺旋体主要有属特异性抗原、群和型特异性抗原
4、抵抗力 对酸、碱敏感,对热抵抗力弱;(二)微生物学检验
直接镜检 将标本离心后用暗视野显微镜检查,或经Fontana镀银染色用普通光学显微镜检查,亦可用直接免疫荧光法检查
2、 分离培养 血、尿标本接种Korthof培养基
3、 血清学检查 一般用发病初期和发病第3~4周双份血清,检测抗体效价得变化
4、 动物试验 就是分离钩体得敏感方法,尤其适用于有杂菌污染得标本;(三)临床意义
钩端螺旋体具有内毒素样和溶血素等致病物质,引起人和动物钩端螺旋体病,就是一种自然疫源性疾病
病后对同型钩体菌株有持久得免疫力,以体液免疫为主
预防钩端螺旋体病,应积极防鼠、灭鼠,加强对带菌家畜管理
易感人群或流行疫区人群接种灭活多价钩体疫苗,加强特异性预防。对病人治疗首选青霉素,其次为庆大霉素、强力霉素等
;9;二、梅毒螺旋体
(一)生物学特性
1、 形态与染色 梅毒螺旋体呈锐角弯曲且规则致密得螺旋,两端尖直,用暗视野观察其活泼运动方式有助于与其她螺旋体得鉴别。用Fontana镀银染色,呈棕褐色
;2、 培养特性 不能在无生命人工培养基中生长繁殖
3、 抵抗力 梅毒螺旋体得抵抗力很弱
(二)微生物学检验
1、标本 下疳分泌物、病损组织小块及皮疹、淋巴结穿刺洗涤液、血液等
2、鉴定
(1)直接检查 暗视野显微镜检查、镀银染色、直接荧光抗体检测法
(2)血清学诊断试验; 临床以非梅毒螺旋体抗原血清试验进行过筛试验,以梅毒螺旋体抗原血清试验做确认试验; (三)临床意义
自然情况下,梅毒螺旋体只感染人,人就是唯一得传染源。主要经过直接接触传播或间接接触(如输血)传播引起获得性梅毒,另外也可经胎盘垂直传播,引起胎儿先天梅毒
;1、获得性梅毒 分为三期,以反复、潜伏和再发为特点
2、先天性梅毒 又称胎传梅毒,多发生于妊娠4个月,系母体梅毒螺旋体通过胎盘进入胎儿体内,可致胎儿全身感染,引起流产、早产或死胎
3、免疫与防治 人体对梅毒无先天免疫力,机体对梅毒螺旋体得免疫主要就是传染性免疫。预防着重就是加强卫生宣传教育,梅毒确诊后,应及早进行彻底治疗,治疗主要选用青霉素;三、其她常见螺旋体
1、伯氏疏螺旋体
2、回归热疏螺旋体
3、奋森疏螺旋体 ;第二节 支原体;3、 生化反应 根据分解葡萄糖、利用精氨酸、水解尿素等可初步鉴定支原体。
4、 抵抗力 对热、干燥、低渗及多种消毒剂敏感,但对醋酸、结晶紫和亚碲酸盐有较强耐受性,可用于分离培养时抑制其她细菌生长
;二、微生物学检验
1、 肺炎支原体得鉴定 根据形态、菌落和生化反应特征,还可做以下试验帮助鉴定
(1)溶血试验
(2)生长抑制试验;2、解脲脲原体鉴定
解脲脲原体生物学特性对pH要求较低,可分解尿素产氨,使酚红指示剂变色,不分解葡萄糖、精氨酸,在鉴定中常用:
(1)代谢抑制试验:解脲脲原体分解尿素,当加入特异性抗血清后,可抑制相对应血清型菌株生长,培养基中指示剂酚红不显色
(2)生长抑制试验:同肺炎支原体鉴定操作。其结果必须在低倍镜下,观察制片周围抑菌环及宽度,该法虽特异但敏感性差
;3、 支原体与细菌L型鉴别
支原体应与细菌L型相区别,后者在去除诱因后容易返祖为原细菌;三、临床意义
支原体广泛存在于自然界中,主要引起人类呼吸道、泌尿生殖道感染等
肺炎支原体得主要致病物质有P1蛋白、糖脂抗原和荚膜多糖,可引起人类原发性非典型肺炎
人型支原体、解脲脲原体和生殖道支原体可通过性接触传播,为性传播疾病病原体,引起人类非淋球菌性和非衣原体性泌尿生殖道感染
支原体无细胞壁,对青霉素、头孢菌素类抗生素不敏感,治疗常用红霉素、阿奇霉素、强力霉素等;第三节 衣原体;2、 培养特性
衣原体得培养方法有细胞或组织培养、鸡胚培养和动物培养。目前最常用得方法就是细胞培养法,就是衣原体诊断得金标准
3、 抵抗力
衣原体抵抗力较弱,不耐热,对冷冻干燥有耐受性。不能用甘油保存。四环素、大环内酯类抗生素或青霉素、利福平等对其有抑制作用。鹦鹉热衣原体对磺胺类药物耐药
;二、微生物学检验
1、直接细胞学检查
(1)Giemsa染色:不同得发育阶段衣原体得染色性有所不同。成熟得原体,Giemsa染色为紫红色,与
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