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3.2高效液相色谱技术 高效液相色谱法原理及分析 1. 3. 2. 液相色谱法的基本原理 液相色谱的分类 定量分析方法 第三十页，共七十一页。 概述 高效液相色谱是利用溶质在两相间分配系数、亲和力、吸附力或分子大小不同而引起的排阻作用的差别使不同溶质得以分离。 色谱法是一种分离技术。 混合物分离过程：试样中各组分在 色谱分离柱中的两相间不断进行着的 分配。 一相固定不动，称为固定相。 另一相是携带试样混合物流过固定 相的液体，称为流动相。 3.2.1高效液相色谱原理 第三十一页，共七十一页。 当混合物进入色谱柱后，就在固定相、流动相之间不断地进行分配平衡。不同的化合物，分子结构不同，理化性质不同，所以在两相中存在的浓度也各不相同。固定相中存在量多的化合物，冲洗出柱子的时间就长，反之则短。这与分配系数K有关： K值小，先流出柱子，K值大的，保留作用强，后流出柱子。 3.2.2高效液相色谱原理 第三十二页，共七十一页。 3.2.3高效液相色谱分类 按流动相和固定相特征分为 正相色谱、反相色谱 按分离目的分为 分析型、制备型 按分离机理分为 吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、凝胶色谱等。 第三十三页，共七十一页。 3.2.3高效液相色谱分类 1、吸附色谱法： 固定相：吸附活性强弱不等的吸附