多聚酶链式反应扩增片段新.pptVIP

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  • 2023-03-27 发布于广东
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第一页,共三十九页,2022年,8月28日 DNA指纹法在案件侦破中有重要作用,刑侦人员通过案发现场的血液、头发等样品中提取的DNA,与犯罪嫌疑人的DNA进行比较,就由可能为案件的侦破提供证据。 讨论: 1.犯罪嫌疑人留在现场的样品一般都是极少量的,刑侦人员要怎样才能得到足够量的DNA呢? 2.你还能说出DNA鉴定技术在其他方面的应用吗? 第二页,共三十九页,2022年,8月28日 ★分子生物学研究中最强大的实验技术之一 ★其本质是在体外模拟细胞内DNA分子复制的过程 美国科学家 穆利斯(K.B.Mullis) 发明了PCR技术  1993年诺贝尔奖 第三页,共三十九页,2022年,8月28日 (一)DNA分子的结构 C、H、O、N、P 1.元素组成: 脱氧核苷酸 2.基本单位: 一、基础知识 脱氧核苷酸 脱氧核苷 磷酸 脱氧核糖 含氮碱基 嘌呤 嘧啶 腺嘌呤(A) 鸟嘌呤(G) 胞嘧啶(C) 胸腺嘧啶(T) 第四页,共三十九页,2022年,8月28日 脱氧 核糖 含氮碱基 磷酸 A G C T DNA的基本单位-脱氧核苷酸 1 2 3 4 5 O 第五页,共三十九页,2022年,8月28日 鸟嘌呤脱氧核苷酸 胞嘧啶脱氧核苷酸 胸腺嘧啶脱氧核苷酸 脱氧核苷酸的种类 A 腺嘌呤脱氧核苷酸 G C T 第六页,共三十九页,2022年,8月28日 一个核苷酸上的磷酸基团上的“-OH”和另一个核苷酸分子的第3位碳原子上的羟基之间失去一分子水,形成磷酸二酯键,即在相邻的两个脱氧核苷酸的3’和5’碳原子之间形成磷酸二酯键。数量庞大的四种脱氧核苷酸通过3’,5’-磷酸二酯键彼此连接起来形成脱氧核苷酸链。通常将DNA的羟基“-OH”末端称为3’端,而磷酸基团的末端称为5’端 3.脱氧核苷酸链的形成 脱氧核苷酸链结构简图 第七页,共三十九页,2022年,8月28日 A T G C A G C T 氢键 5端 3端 5端 3端 DNA分子的平面结构 第八页,共三十九页,2022年,8月28日 DNA分子的平面结构 A T G C A G C T 氢键 5端 3端 5端 3端 识别 : -OH端为3′; 磷酸基团的末端为5′。 第九页,共三十九页,2022年,8月28日 4.DNA分子的双螺旋结构 ⑴.DNA分子是由 的(即一条链为3’-5’,另一条链为5’-3’)脱氧核苷酸长链盘旋而成的规则 结构。 ⑵. 与 交替连结,排列在外侧,构成基本骨架; 排列在链的内侧。 ⑶.两条链上的碱基通过 连结起来,形成碱基对。碱基对的组成有特定的规律:即腺嘌呤一定与 配对, 一定同胞嘧啶配对。 双螺旋 两条反向平行 脱氧核糖 磷酸 碱基 氢键 胸腺嘧啶 鸟嘌呤 第十页,共三十九页,2022年,8月28日 (1)DNA分子是由 的(即一条链为3’-5’,另一条链为5’-3’)脱氧核苷酸长链盘旋而成的规则 结构。 4.DNA双螺旋结构特点: (2) 与 交替连结,排列在外侧,构成基本骨架; 排列在链的内侧。 (3)两条链上的碱基通过 连结起来,形成碱基对。碱基对的组成有特定的规律:即腺嘌呤(A)一定与 配对, 鸟嘌呤(G)一定同 配对。 两条反向平行 双螺旋 脱氧核糖 磷酸 碱基 氢键 胸腺嘧啶(T) 胞嘧啶(C) 第十一页,共三十九页,2022年,8月28日 2、时间: 细胞分裂间期(有丝分裂间期,减数第一次分裂的间期) 1、概念:以亲代DNA为模板,根据碱基互补配对合成子代在DNA的过程。 3、场所:主要是细胞核 (其次是线粒体、叶绿体) 二.细胞内DNA复制的过程 第十二页,共三十九页,2022年,8月28日 4、 条件: ① 模板: 亲代DNA的两条母链 ② 原料: 游离的四种脱氧核苷酸 ③ 能量: ATP ④ 酶: 解旋酶 、DNA聚合酶 ⑤ 引物:一小段RNA,能与DNA母链的一段碱基序列互补配对 5、过程 (1)解旋:解旋酶 、ATP (2)以DNA的两条母链为模板,根据碱基互补配对规则,合成子链。 (3)子链、母链螺旋构成子代DNA 第十三页,共三十九页,2022年,8月28日 6、复制特点 半保留复制,边解旋边复制,多起点复制。 7、DNA复制的方向 DNA的合成方向总是从子链的5’端向3’端延伸 第十四页,共三十九页,2022年,8月28日 第十五页,共三十九页,2022年,8月28日 8.遵循原则: 碱基互补配对原则 9.精确复制的原因 a.规则的双螺旋结构为复制提供了精确

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