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《生物化学实验》课程教学大纲 课程编号：0802005 课程总学时/学分：30/1.5（其中理论0学时，实验30学时） 课程类别：学科基础与专业必修课 一、教学目的和任务 生物化学实验是配合生物化学理论教学设置的专业基础课，通过本实验课的学习使学生了解生物大分子的分离纯化方法，蛋白质、核酸及主要代谢产物的定性、定量分析技术，酶活性测定的方法和技术。力求使学生能够对生物化学实验技术的基本理论和概念有更加深刻的认识，激发学生对探索生物化学规律的浓厚兴趣。培养学生严谨的科学态度，培养学生分析问题和解决问题的能力，锻炼学生的实际操作能力。 二、教学基本要求 本课程是在有机、无机及分析化学实验的基础上，学习生物化学研究的基本方法，较熟练地掌握比色、层析、电泳、离心等基本实验技术的原理和操作，提高观察、分析和解决问题的能力，培养学生实事求是的科学态度和扎实、严谨的工作作风，为学习后续课程和将来的实际工作及科学研究打好基础。 三、教学内容及学时分配 [实验一] 常用生化实验技术原理与应用 [实验要求] 通过实验理论的讲解与演示，掌握常用生化实验技术的原理与基本操作，主要有离心技术、电泳技术、层析技术、分光光度技术等。 [实验学时] 3学时 [实验二] 氨基酸的分离鉴定——纸层析法 [实验要求] 了解分配层析、纸层析法的基本原理；理解氨基酸纸层析法的原理；掌握纸层析法的操作方法，熟悉Rf值及其影响因。 [实验学时] 3学时 [实验三] 乙酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白 [实验要求] 了解电泳的一般原理；理解醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白的原理；掌握醋酸纤维薄膜的电泳操作技术。 [实验学时] 4学时 [实验四] 氨基酸和蛋白质的颜色反应及蛋白质的变性与沉淀 [实验要求] 本实验要求掌握构成蛋白质的基本结构单位和蛋白质及氨基酸的呈色反应原理，学会几种常用的鉴定蛋白质和氨基酸的方法，了解影响呈色反应的干扰因素。了解蛋白质沉淀与变性的关系，知道几种蛋白质沉淀方法的实际意义，加深对蛋白质胶体性质的认识。 [实验学时] 4学时 [实验五] 酶促反应动力学 [实验要求] 本实验要求掌握激活剂和抑制剂、温度、pH值对酶活性影响，加深对酶性质的认识，学会进行简单的实验设计。 [实验学时] 4学时 [实验六] 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量 [实验要求] 本实验要求掌握考马斯亮蓝G-250染色法测量蛋白质含量的原理和方法，掌握分光光度计的使用，学会标准曲线的制作方法。 [实验学时] 4学时 [实验七] 维生素C的定量测定——2，6-二氯酚靛酚法 [实验要求] 了解维生素C的生理意义；理解2.6—二氯酚靛酚滴定法的优缺点；掌握维生素C定量测定的原理，掌握微量滴定管的使用。 [实验学时] 3学时 [实验八] 动物肝脏中DNA的提取及鉴定 [实验要求] 本实验要求掌握浓盐法从动物组织中提取DNA的基本原理和操作方法，熟悉DNA鉴定的原理及方法。 [实验学时] 4学时 [实验九] 小麦萌发前后淀粉酶活力测定 [实验要求] 了解小麦萌发前后淀粉酶活力的变化；理解分光光度法的原理；掌握测定淀粉酶活力的方法，分光光度计的使用方法。 [实验学时] 4学时 根据实际情况选择30学时的实验项目。 四、推荐教材及参考书目 [1] 刘箭．《生物化学实验教程》（第二版）．科学出版社，2010 [2] 陈钧辉．《生物化学实验》（第五版）．科学出版社，2014 [3] 余冰宾．《生物化学实验指导》．清华大学出版社，2004 [4] 童耕雷．《生物化学实验》．上海交通大学出版社，2005