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《分子生物学专题》课程教学大纲 课程编号：0804064 课程总学时/学分：30/2（其中理论30学时，实验0学时） 课程类别：专业任选课 一、教学目的和任务 《分子生物学专题》分子生物学专题作为生物科学、生物技术专业任选课程，在分子生物学的基础上，探讨分子生物学经常采用的研究方法与技术手段，介绍分子生物学的最新研究进展。 二、教学基本要求 通过本课程的学习使学生对分子生物学的基本理论有更深入的理解，掌握分子生物学常用的各种研究手段，培养学生的抽象思维、逻辑推理能力，为学生进一步深造打下坚实的理论基础。 三、教学内容及学时分配 专题一 基因表达调控（6学时） 第一节 原核生物基因表达的调控 一、阿拉伯糖操纵子模型 二、衰减子作用 三、反义RNA调节 四、Lamda噬菌体的生活史 第二节 真核生物基因表达的调节 一、DNA水平的调节 二、染色体水平的调节 三、转录及转录后水平的调节 四、翻译及翻译后水平的调节 本专题教学要求： 熟悉基因表达调控方式、原核和真核生物基因表达的调控的机制。 专题二 基因重组技术（6学时） 第一节 基因重组概述 一、重组DNA技术的定义 二、重组DNA技术基本步骤 三、重要的工具酶 四、主要的载体 第二节 目的基因的获得 一、获得目的基因的原理与方法 二、目的基因序列测定 第三节 重组体的构成、导入和筛选 一、基因克隆的载体 二、目的基因与载体的连接 三、重组子导入受体 四、重组子的筛选与鉴定 第四节 重组体在宿主细胞申的表达与调控 一、基因表达概述 二、重组体在原核细胞中的表达和调控 三、重组体在真核细胞中的表达和调控 本专题教学要求： 掌握重组DNA技术的的原理、方法和步骤。 专题三 PCR技术（6学时） 第一节 PCR的概念和基本原理 第二节 PCR相关的技术 一、RT-PCR 二、RAPD即随机扩增多态性DNA技术 三、mRNA差示技术 四、差减法杂交 第三节 实时荧光定量PCR 一、实时荧光定量PCR概念 二、各种荧光示踪方法的介绍 三、实时荧光定量PCR定量理论和基本知识 定量理论和基本知识第四节 核酸的测序技术 第五节 核酸的降解和核苷酸代谢 本专题教学要求： 掌握PCR原理，PCR技术种类，PCR技术在现代生物化学与生命科学上的应用，PCR技术体系的成分与最适条件，试剂的配制与操作步骤及注意事项。 专题四 DNA测序技术（6学时） 第一节 传统测序原理及方法 一、化学测序法 二、双脱氧终止法 三、自动测序法 第二节 高通量测序法 一、大规模平行签名测序（Massively Parallel Signature Sequencing, MPSS) 二、454焦磷酸测序（454 pyrosequencing） 三、Illumina (Solexa) sequencing 四、新一代测序法简介 本专题教学要求： 掌握传统测序的原理和基本过程；了解常见的高通量测序法的基本原理及应用。 专题五 基因敲除技术（6学时） 第一节 经典的基因敲除技术 一、同源重组法基因敲除 二、诱导性基因敲除 三、随机插入法基因敲除 第二节 新型的基因敲除技术 一、RNA干扰法基因敲除 二、锌指核酸酶基因敲除 三、TALENs基因敲除 四、CRISPR-Cas9基因敲除 本专题教学要求： 掌握经典的基因敲除技术的原理和过程；了解新型的基因敲除技术的基本原理及应用。 四、推荐教材及参考书目 [1] 艾利森．《基础分子生物学》．高等教育出版社，2008 [2] 王廷华．《PCR理论与技术》．科学出版社，2005 [3] 莎姆布鲁克．《分子克隆》．科学出版社，2005 [4] 陈惠黎．《生物大分子的结构与功能》．上海医科大学出版社，1999