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                第一页,共四十页,2022年,8月28日 一、基因工程概述 建立在植物分子遗传学与细胞生物学基础理论上的基因工程是通过基因导入与重组技术,将不同生物的遗传基因在体外进行分离、裁剪、组合与拼接,再通过载体转移到受体细胞内进行无性繁殖、稳定表达,从而改变受体原来的遗传性状,人工构建出新的作物品种。 第二页,共四十页,2022年,8月28日 二、基因操作的工具  1、 基因的“剪刀”——限制性核酸内切酶     专一性: 识别特定核苷酸序列,在特定的切点切DNA,具特异性。并裂解磷酸二酯键,产生两个黏性末端。   第三页,共四十页,2022年,8月28日 例:大肠杆菌的一种限制酶(EcoRⅠ)能识别    GAATTC序列,并在G和A之间切开。 EcoRⅠ 黏性末端 第四页,共四十页,2022年,8月28日 2、基因的“针线” ——DNA连接酶连接酶的作用:     将互补配对的两个黏性末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子。连接的部位:    生成磷酸二酯键DNA连接酶的作用过程: 第五页,共四十页,2022年,8月28日 连接酶的作用是:将互补配对的两个黏性末端连接                        起来,使之成为一个完整的DNA分子。 第六页,共四十页,2022年,8月28日 基因的针线:DNA连接酶 G  A  A  T  T  C C  T  T  A  A  G G  A  A  T  T  C C  T  T  A  A  G G  C  T  T  A  A   A  A  T  T  C   G G   C  T  T  A  A    A  A  T  T  C   G G  C  T  T  A  A   A  A  T  T  C  G 用同种限制酶切割 第七页,共四十页,2022年,8月28日 3、基因的运载体——质粒或病毒 作用:     将外源基因送入受体细胞。 条件: 能在宿主细胞内复制     并稳定地保存。 具有多个限制酶切点。 具有某些标记基因。 种类:     质粒、噬菌体和动植物病毒。 第八页,共四十页,2022年,8月28日 从细胞中分离出DNA 从大肠杆菌中提取质粒 限制  酶 提取目的基因 限制酶 目的基因与运载体结合 DNA连  接酶 目的基因导入受体细胞 目的基因的表达与检测 基因工程操作的基本步骤 第九页,共四十页,2022年,8月28日 三、植物基因工程的基本模式、外源DNA导入方法与表达条件 植物基因工程的基本模式是先分离和制备目的基因,并将目的基因嵌入载体,获得重组DNA,然后将重组DNA导入受体植物细胞,使其稳定存在并能复制、转录和翻译。重组DNA还可经有性或无性方式传递给子代,达到按育种目标修饰和改造作物品种遗传性状的目的。 第十页,共四十页,2022年,8月28日     目的基因导入受体植物细胞中能否表达的关键,在于植物细胞的转录系统能不能识别目的基因所携带的转录信号——启动子顺序。研究结果表明,外源基因要先和载体结合,载体携带外源基因共同进入受体细胞内后,就会整合到受体植物的DNA上,由于植物转录系统能识别启动子的顺序信号,外源基因即可在受体植物细胞中得到表达。因此,基因工程的许多研究工作都围绕着寻找理想的载体而开展。目前最有希望作为目的基因载体物质的是根癌农杆菌Ti质粒。 第十一页,共四十页,2022年,8月28日 四、基因工程培育优质、高产农作      物品种的进展 植物基因移植与导入技术的研究成功,为改变植物蛋白质、脂肪、淀粉与糖类的含量与品质,提高其营养价值,以及为改变蔬菜、果品的风味提供了可能与技术途径。世界各国应用基因工程进行农作物品质改良与优质、高产品种选育方面已取得了很大的进展。 第十二页,共四十页,2022年,8月28日 转基因水果 第十三页,共四十页,2022年,8月28日 1、 美国科学家将大豆贮藏蛋白的基因分别转移到向日葵和马铃薯中,获得蛋白质含量高的“向日豆”和“肉土豆”品种;日本科学家将大豆蛋白转移到水稻,培育成功“大豆米”,这对改善稻米品质,提高其营养价值起到了重要作用。 2、日本农林水产业研究中心与北兴化学公司的研究人员联合,采用基因重组技术,先从稻谷中分离出能促进赖氨酸与色氨酸合成的遗传基因,然后对该基因进行改造,加强其合成氨基酸的能力,再将重组后的基因移植入水稻,成功的培育出赖氨酸和色氨酸比普通水稻高10—90倍的转基因水稻新品种。 第十四页,共四十页,2022年,8月28日 3、我国东北师范大学的科研人员通过基因导入途径,将野生天兰冰草抗病、高蛋白基因的染色体片段,转移到小麦染色体行后再运用常规育种方法,选育出优质面包小麦新品种“小冰小麦33号”,经专家鉴定达到国际优质小麦标准。该品种蛋白质含量
                
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