河北医大中药药理学实验指导03中药药理实验研究的基本要求.docxVIP

第三章 中药药理实验研究的基本要求 第一节 中药药理实验设计的基本知识 一、中药药理实验设计的重要性 中药药理研究首要的问题，就是对实验研究的周密设计，因为实验设计是实验过程的依据，是实验数据处理的前提，也是提高实验研究质量的一个重要保证。严密而合理的实验设计，不但可对实验结果和误差有比较准确的估计，最大限度地获得丰富而可靠的资料，而且还可减少人力，节省物力和时间，提高工作效率，避免因实验设计不当，造成人力、物力的浪费，甚至全功尽弃的不良结果。因此，实验研究设计，从中药药理实验研究过程来看，具有非常重要的意义。 二、实验设计的内容 1、明确研究目的和意义：实验设计，首先应考虑研究目的和意义，根据研究的中心问题，进行实验内容设计，做到心中有数，有的放失。 2、确定实验组和对照组：实验组和对照组之间除了处理不同，其他条件均应等同。保持实验可比性的原则。在新药审批办法中规定，新药的主要药效作用各项实验均应有空白对照和已知药物对照。药理试验结果需经统计学处理。 3、确定实验方法、项目和指标：要有明确的规定和说明，要注意选择能反映被研究问题的本质的关键指标。药理作用及其机理能用客观方法定性地加以测量，取得准确可靠的数据。 4、确定实验对象的数量：中药药理实验研究对象包括正常动物、麻醉动物及病理模型；既有整体体内试验，也有离体器官、组织或细胞体外试验等。尽量研究各种接近中医临床证候的动物病理模型，按中医药治则，观察中药药理与疗效，但也不排除对正常动物或离体器官等的作用分析。由于动物实验和临床观察毕竟有一定差别，因此考虑用不同动物多种方法测试，往往是必要的。要根据实验目的、方法的指标的要求决定实验动物、样本及数量、计量资料，一般小动物（大、小鼠)每组8—12只，较大动物（兔、狗)每组5—8只是基本的，总量应符合统计要求。 5、资料整理和统计：将纪录的资料作为必要的分析、整理，经过恰当的统计分析，作出结论。 三、实验设计的原则 实验设计的三大原则：对照、重复和随机。 1、对照：比较研究是科实验不可少的条件，没有比较，不难以鉴别，也就缺乏科学性，所以实验设计必须设立对照组。而对照组与实验组之间除用以实验的药物，处理的区别之外，其他条件如实验动物、方法、仪器、环境及时间等应相同。动物的种属、品系、性别、窝别、年龄、体重、健康状况等方面尽量一致以减少误差。一般将“齐同对比”归纳为“同时、同地、同环境、同种、同重、同批号”等几个方面。 根据实验研究的内容不同，可选用不同的对照形式，常用的方法有下列4种： （1)空白对照：指在不加任何处理的条件下进行观察对照。 （2)假处理对照：即除不用被研究的药物外，对照组的动物要经受同样的处理，如给予生理盐水或不含药物的溶酶。又称“阴性对照”。 （3)标准对照：指以已知经典药物在标准条件下与实验药进行对照。又称“阳性对照”。必要时可设两个作用机制不同的阳性对照药。 （4)组间对照：系在实验组间分几个剂量组互为对照进行对比，以便说明量效关系或药效的剂量依赖性。一般设2—3个剂量组。 另外，也可用自身作用给药前后对比者，但最终还是需要作组间对照来说明问题。 2、重复：能在类似条件下，把实验结果重复出来，才算是可靠的实验，重复实验除增加可靠性外，也可了解实验变异情况。 3、随机：就是按照机遇均等的原则来进行分组。其目的是使一切干扰因素造成的实验误差减少，而不受实验者主观因素或其他偏性误差的影响。随机化的手段可采用编号卡片抽签法，随机数字表或采用计算器的随机数字键。近年来提倡“均衡下的随机”，即先将能控制的主要因素（如体重、性别等)先行均衡地归类分档，然后在每一档中随机地取出等量动物分配到各组，使那些难控制因素（如活泼、饥饱、疲劳和度及性周期等)得到随机化的安排。 第二节?实验数据的整理与统计方法 中药药理（药理)实验主要是通过动物理化实验来认识药物作用的特点和规律，其实验观测到的数据资料按其实验指标的性质，分为质反应（计数)资料和量反应（计量)资料两大类。 一、量反应资料 实验数据通过测量而得，以计量数字的多少来表示。如血压、心率、血细胞数、电刺激阈值等，也可用实测变化比值或变化率作为测量资料，如血压升降数值，心率和呼吸增减次数、尿量增减、血糖升降以及血红蛋白升降等数值；评分分值的半定量资料也属计量资料范畴。 量反应资料的特点是每一个观察对象可得一个定量的数据，所以信息量丰富。量反应资料的统计分析最常用t检验, 可用下列公式计算： 例数相等时：?? 例数不等时：? 通常以均数作为一组数据的集中性参数，以标准差s作为其离散性参数，第三个参数是该组例数（n),三个参数常写成±?s?(n)的形式。其中，Σ是总和的数学符号，Σχ是各实验数据χ的总和，Σχ2?是χ平方的总和，(Σχ)2?是χ总和的平方。 ?t值法的判断标准为：算出