实验六 植物活性多糖提取
一、实验目的1. 掌握多糖的提取方法;2. 了解多糖的性质与作用
二、实验原理多糖是由多个单糖分子缩合、失水而成,是一类分子结构复杂且庞大的糖类物质。目前已发现的天然多糖有300多种,它们在免疫调节、抗肿瘤、抗炎、抗病毒、降血糖、抗衰老、抗辐射等方面发挥着生物活性作用。这类多塘不溶于有机溶剂,因此通过对样品进行粉碎后,经有机溶剂脱蛋白、脱脂和脱色处理,再用沸水浸提,滤液经浓缩、乙醇沉淀,过滤干燥后可得粗多糖。
三、实验试剂与器材1. 试剂50g/L苯酚、浓硫酸、95%乙醇。2.器材可见分光光度计、电子分析天平、数显恒温水浴锅、电热恒温干燥箱、离心机、移液管等。
四、实验步骤1. 植物样品的预处理新鲜样品去除杂质后,50℃~60℃常压干燥,粉碎后过40目筛。在常温下,用4倍体积样品的乙酸乙酯浸泡干燥的试验样品3h,用蒸馏水清洗残留的有机溶剂至样品无异味。将样品于温度105℃的烘箱内烘干至恒重,得脱脂样品。
四、实验步骤2.提取准确称取0.500g粉末置于烧杯中,加入适量的蒸馏水置于水浴锅中浸提。过滤后准确吸取滤液4mL,加入95%的乙醇16mL混匀,离心10min (3000r/min),弃去上清液,沉淀用蒸馏水复溶,定容至100mL。准确吸取0.5mL,加入50g/L的苯酚0.3mL,混匀后迅速加入2.0mL浓硫酸,充分摇匀后40℃下水浴20min,以试剂空白调零,在490nm处测定吸光度,并与标样做对照,求出样品中多糖含量。
五、实验结果与分析按下式计算多糖得率:
六、思考题1. 在多糖提取过程中,为什么温度不能过高?2. 在多糖提取过程中,为什么要进行脱色?
THANKS谢谢
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