农业农村部公告第197号-6-2019CN.docx

ICS 65.120 B 46 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 农业农村部公告第197号一6-2019 饲料中利巴韦林等7种抗病毒类 药物的测定 液相色谱- 串联质谱法 Determination of 7 antivirotics including ribavirin in feeds— Liquid chromatography-tandem mass spectrometry 2019-08-01 发布 2020-01-01 实施 中华人民共和国农业农村部发布 农业农村部公告第197号—6—2019 前 言 本标准按照GB/T 1.1—2009 给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由农业农村部畜牧兽医局提出。 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会(SAC/TC 76)归口。 本标准起草单位：上海市兽药饲料检测所。 本标准主要起草人：黄士新、吴剑平、潘娟、张婧、严凤、商军、顾欣、姜芹、田恺、张亦菲、张浩然。 工 1 农业农村部公告第197号—6-2019 饲料中利巴韦林等7种抗病毒类药物的测定 液相色谱-串联质谱法 1 范围 本标准规定了饲料中金刚烷胺、吗啉胍、金刚乙胺、阿昔洛韦、利巴韦林、更昔洛韦和奥司他韦7种抗 病毒类药物的液相色谱-串联质谱法。 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料和添加剂预混合饲料中金刚烷胺、吗啉胍、金刚乙胺、 阿昔洛韦、利巴韦林、更昔洛韦和奥司他韦7种抗病毒类药物的测定。 本标准方法的检出限为20μg/kg,定量限为50μg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 14699.1 饲料采样 GB/T 20195 动物饲料试样的制备 3 原理 用甲酸铵缓冲溶液和乙腈提取试样中的7种抗病毒类药物，再经分散固相萃取净化后，用亲水相互作 用色谱-串联质谱法测定，以基质匹配标准外标法定量。 4 试剂或材料 除特殊注明外，本法所用试剂均为分析纯。 4.1 水：GB/T 6682规定的一级水。 4.2 乙腈：色谱纯。 4.3 甲醇：色谱纯。 4.4 甲酸：色谱纯。 4.5 丙基乙二胺(Primary secondary amine,PSA):60目。 4.6 无水硫酸镁。 4.7 甲酸铵溶液(0.05 mol/L):取3.15g 甲酸铵用水溶解后定容至1L,用甲酸(4.4)调pH 至4.3±0.1。 4.8 抗病毒类药物标准储备液(200μg/mL): 分别准确称取金刚烷胺、吗啉胍、金刚乙胺、阿昔洛韦、利巴韦 林、更昔洛韦和奥司他韦对照品(含量大于97%)各20 mg (精确至0.01 mg), 置100 mL 容量瓶中，用甲醇 (4.3)溶解并定容至刻度，配制成浓度为200μg/mL 的标准储备液， 一20℃以下保存，有效期为3个月。 4.9 抗病毒类药物混合标准中间溶液(1μg/mL): 分别取7种抗病毒类药物标准储备液1mL 置200mL 容量瓶中，用乙腈稀释并定容至刻度，配制成浓度为1μg/mL 的混合标准中间溶液， -20℃以下保存，有 效期为1个月。 4.10 尼龙滤膜：0.22 μm。 5 仪器设备 5.1 pH 计。 5.2 分析天平：感量0.01mg 和感量1 mg。 2 农业农村部公告第197号—6—2019 5.3 涡旋混合器。 5.4 高速冷冻离心机：转速不低于8000 r/min。 5.5 振荡器。 5.6 台式离心机：转速不低于14000 r/min。 5.7 液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾离子源。 6 样品 按GB/T14699.1 抽取有代表性的饲料样品，用四分法缩减取约200 g,按照 GB/T 20195的规定制 备样品，粉碎后过0.45 mm 孔径的分析筛，混匀，装入磨口瓶中，备用。 7 试验步骤 7.1 提取 平行做2份试验。准确称取2.00 g 试样(精确至1 mg) 置于50 mL 离心管中，加5 mL 0.05 mol/L 甲酸铵溶液(4.7),涡旋振匀，8000 r/min 离心3 min,收集上清液；残渣加入5 mL 乙腈振荡提取残渣3 min,8000r/min 离心3min 后收集上清液。重复上述整个提取过程1次，合并上清液作为提取液备用。 7.2 净化 移取提取液(7.1)200μL,加入乙腈800μL 稀释后，依次加入无水硫酸镁(4.6)100 mg、PSA 粉(4.5) 100mg, 涡旋1 min 后140