农业农村部公告第282号-1-2020CN.docx

ICS 65.120 B 46 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 农业农村部公告第282号— 1—2020 饲料中炔雌醇等8种雌激素类药物的测定 液相色谱-串联质谱法 Determination of eight kinds of estrogens including estriol in feeds— Liquid chromatography-tandem mass spectrometry 2020-03-20 发布 2020-07-01 实施 中华人民共和国农业农村部发布 农业农村部公告第282号—1—2020 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1—2009 给出的规则起草。 本标准由农业农村部畜牧兽医局提出。 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会(SAC/TC 76)归口。 本标准起草单位：农业农村部农产品质量安全监督检验测试中心(宁波)、石家庄市兽药饲料监察所 本标准主要起草人：吴银良、赵健、吕燕、杨挺、朱勇、李云、付岩、陈国、张艳、章豪、张亮、江潇潇、王 全胜。 1 农业农村部公告第282号—1—2020 饲料中炔雌醇等8种雌激素类药物的测定 液相色谱-串联质谱法 1 范围 本标准规定了饲料中雌三醇、雌酮、炔雌醇、17α-雌二醇、17β-雌二醇、已烯雌酚、己烷雌酚和己二烯雌 酚等雌激素类药物的液相色谱-串联质谱测定方法。 本标准适用于肉粉和肉骨粉等饲料原料、配合饲料、浓缩饲料、预混合饲料和精料补充料中雌激素类 药物的测定。 本标准的方法检测限为0.5μg/kg,定量限为1.0μg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 14699.1 饲料 采样 GB/T 20195 动物饲料 试样的制备 3 原理 试样中的雌激素类药物经乙腈振荡提取，吹干后用乙酸乙酯溶解，再通过液液萃取净化，液相色谱-串 联质谱法测定，内标法定量。 4 试剂或材料 除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和符合GB/T 6682规定的一级水。 4.1 雌激素类药物对照品：雌三醇、雌酮、炔雌醇、17α-雌二醇、17β-雌二醇、己烯雌酚、己烷雌酚和己二烯 雌酚的纯度均大于95%。 4.2 氘代雌激素类药物对照品：雌三醇-D?、雌酮-D?、炔雌醇-D4、17α-雌二醇-D?、17β -雌二醇-D2、己烯雌 酚-D?、己烷雌酚-D? 和己二烯雌酚-D? 的纯度均大于95%。 4.3 乙腈：色谱纯 4.4 乙酸乙酯 4.5 5.0%碳酸钠溶液：取50 g 碳酸钠，用水溶解，加950 mL 水溶解，混匀。 4.6 40%乙腈溶液：取200 mL 乙腈与300 mL 水混匀。 4.7 20%乙腈溶液：取200 mL 乙腈与800 mL 水混匀。 4.8 雌激素类药物和氘代雌激素类药物标准储备液：准确称取适量已知纯度的雌激素类药物对照品雌三 醇、雌酮、炔雌醇、17α-雌二醇、17β-雌二醇、已烯雌酚、己烷雌酚和已二烯雌酚及氘代雌激素类药物对照品 雌三醇-D?、雌酮-D2、炔雌醇-D4、17α雌二醇-D2、17β-雌二醇-D?、已烯雌酚-Ds、己烷雌酚-D? 和己二烯雌酚-Ds, 精准至0.00001 g,分别置于100 mL 棕色容量瓶中，用乙腈(4.3)使之完全溶解，并定容至刻度，使最终浓 度分别为100μg/mL,-18℃ 保存，有效期6个月。 4.9 雌激素类药物标准中间液：分别准确移取雌三醇、雌酮、炔雌醇、17α-雌二醇、17β-雌二醇、已烯雌酚、 己烷雌酚和己二烯雌酚标准储备液(4.8)各5.0mL, 置于100 mL 棕色容量瓶中，用乙腈(4.3)定容至刻 度。该溶液中各雌激素类药物浓度为5.0μg/mL,-18℃ 保存，有效期6个月。 4.10 氘代雌激素类药物标准中间液：分别准确移取雌三醇-D?、雌酮-D?、炔雌醇-D?、17α -雌二醇-D?、17β - 2 农业农村部公告第282号— 1-2020 雌二醇-D?、己烯雌酚-Ds、已烷雌酚-D? 和己二烯雌酚-D? 标准储备液(4.8)各5.0mL, 置于100 mL 棕色容 量瓶中，用乙腈(4.3)定容至刻度。该溶液中各雌激素浓度为5.0μg/mL,-18℃ 保存，有效期6个月。 4.11 氘代雌激素类药物标准工作液：准确移取氘代雌激素类药物标准中间液(4.10)1.0 mL 于10 mL 棕色容量瓶中，用乙腈定容至刻度。该溶液中各雌激素浓度为500μg/L,临用现配。 4.12雌激素类药物标准工作液：准确移取雌激素类药物标