农业农村部公告第197号-8-2019CN.docx

ICS 65.120 B 45 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 农业农村部公告第197号—8—2019 动物毛发中赛庚啶残留量的测定 液相色谱-串联质谱法 Determination of cyproheptadine residue in animal hair— Liquid chromatography-tandem mass spectrometry 2019-08-01 发布 2020-01-01 实施 中华人民共和国农业农村部发布 I 农业农村部公告第197号—8—2019 前 言 本标准按照 GB/T 1.1—2009 给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由农业农村部畜牧兽医局提出。 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会(SAC/TC 76)归口， 本标准起草单位：上海市动物疫病预防控制中心。 本标准主要起草人：严凤、潘娟、黄士新、张婧、黄家莺、曹莹、吴剑平、顾欣、张文刚、华贤辉、孙冰清。 1 农业农村部公告第197号—8—2019 动物毛发中赛庚啶残留量的测定 液相色谱-串联质谱法 1 范围 本标准规定了动物毛发中赛庚啶的液相色谱-串联质谱测定方法。 本标准适用于猪毛、羊毛和牛毛中赛庚啶的测定。 本标准方法的检出限为0.25μg/kg,定量限为0.5 μg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 试样以β葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶酶解，经酸性乙腈溶液提取、混合型强阳离子交换柱净化后，采 用液相色谱-串联质谱仪检测，以二苯拉林为内标，定量测定。 4 试剂或材料 除方法另有规定外，试剂均为分析纯。 4.1水 ：GB/T 6682规定的一级水。 4.2 甲醇：色谱纯。 4.3 丙酮。 4.4乙酸铵缓冲液(0.2 moL/L): 称取15.4g 乙酸铵溶解于1000mL 容量瓶中，加入950 mL 水溶解， 用适量乙酸调节 pH 至5.2,最后定容至刻度，摇匀。 4.5十二烷基磺酸钠(SDS) 溶液：取SDS 0.1g,溶于100 mL 水中。 4.6甲酸溶液：量取800mL 水于1000mL 容量瓶中，加入1 mL 甲酸，用水定容至刻度摇匀。 4.7 盐酸溶液I(0.1mol/L): 量取盐酸9mL 于1000mL 容量瓶中，用水定容至刻度摇匀。 4.8盐酸溶液Ⅱ(5mol/L): 量取50mL 水于100mL 容量瓶中，加入盐酸45mL, 用水定容至刻度摇匀。 4.9 试样提取溶液：乙腈+盐酸溶液I(4.7)=9+1。 4.10氨水甲醇溶液：氨水十甲醇=5+95。 4.11 试样稀释溶液：乙腈+甲酸溶液(4.6)=3+7。 4.12 赛庚啶标准储备溶液：准确称取盐酸赛庚啶(纯度≥98%)12.5 mg (精确至0.01 mg) 置于10mL 容量瓶中，用甲醇稀释定容为1 mg/mL 的标准储备溶液。2℃~8℃冷藏保存，有效期6个月。 4.13二苯拉林标准储备溶液：准确称取盐酸二苯拉林(纯度≥99%)11.4 mg (精确至0.01 mg) 置于10 mL 容量瓶中，用甲醇稀释定容为1mg/mL 的标准储备溶液。2℃~8℃冷藏保存，有效期6个月。 4.14 赛庚啶标准中间溶液：准确移取适量体积的赛庚啶标准储备溶液(4.12),用试样稀释溶液(4.11)稀 释成赛庚啶浓度为100ng/mL 的标准中间溶液。2℃~8℃冷藏保存，有效期1个月。 4.15 二苯拉林内标溶液：准确移取适量体积的二苯拉林标准储备溶液(4.13),用试样稀释溶液(4.11)稀 释成二苯拉林浓度为100ng/mL 的内标溶液。2℃~8℃冷藏保存，有效期1个月。 4.16 赛庚啶标准系列溶液：准确移取赛庚啶标准中间溶液(4.14)10μL、20μL、50 μL、100 μL、500μL、 2 农业农村部公告第197号—8—2019 1000μL 分别置于10mL 容量瓶中(即相当于含赛庚啶为1ng、2ng、5ng、10 ng、50ng、100ng),再准确 移取二苯拉林内标溶液(4.15)500μL 分别置于上述容量瓶中(即相当于含二苯拉林为50 ng),用试样稀 释溶液(4.11)稀释至刻度，配制成浓度分别为0.1 ng/mL、0.2ng/mL、0.5ng/mL、1ng/mL、5ng/mL 和10 ng/mL 的标准系列溶液，内标浓度为5 ng/mL。 临用现配