NY_T 3903-2021CN 枸杞中黄酮类化合物的测定.docx

ICS CCS 65.020.01 B 04 NY 中 华 人 民 共 和 国 农 业 行 业 标 准 NY/T 3903—2021 枸杞中黄酮类化合物的测定 Determination of flavonoids in Lycium barbarum L. 2021-05-07 发布 2021-11-01 实施 中华人民共和国农业农村部 发布 I NY/T 3903—2021 前 言 本文件按照GB/T1.1-2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由农业农村部乡村产业发展司提出并归口 本文件起草单位：宁夏农产品质量标准与检测技术研究所(农业农村部枸杞产品质量监督检验测试中 心)、中国农业科学院农产品加工研究所。 本文件主要起草人：王晓菁、吴燕、张锋锋、牛艳、李庆鹏、王彩艳、杨静、赵子丹、刘霞、陈翔、开建荣、李 彩虹、石欣、王晓静。 NY/T 3903—2021 枸杞中黄酮类化合物的测定 1 范围 本文件规定了枸杞中总黄酮含量的分光光度计测定方法和枸杞中3种黄酮类化合物(见附录 A) 含量 的高效液相色谱测定方法。 本文件适用于枸杞(包含干果、鲜果)中总黄酮及黄酮类化合物含量的测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于 本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义 第一法 分光光度法测定枸杞中总黄酮的含量 4 原理 枸杞中的总黄酮(以芦丁计)经乙醇溶液提取后，在弱碱性条件下与铝盐生成整合物，加入氢氧化钠溶 液后显色，在波长508nm 处测定吸光度值。在一定浓度范围内，该螯合物的吸光度值与总黄酮含量呈正 比，通过与标准系列比较定量。 5 试剂与材料 除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和 GB/T 6682 中规定的一级水。 5.1 试剂 5.1.1 无水乙醇(CH?CH?OH,CAS 号：64-17-5)。 5.1.2亚硝酸钠(NaNO2,CAS 号：7632-00-0)。 5.1.3 硝酸铝[Al(NO?)? ·9H?O,CAS 号：7784-27-2]。 5.1.4 氢氧化钠(NaOH,CAS 号：1310-73-2) 5.2 溶液配制 5.2.1 乙醇溶液(7+3):取70mL 无水乙醇加入30mL 水中，搅拌均匀、备用。 5.2.2 乙醇溶液(3+7):取30mL 无水乙醇加入70mL 水中，搅拌均匀、备用。 5.2.3 亚硝酸钠溶液(50g/L): 准确称取5.00g 亚硝酸钠于烧杯中，加适量水溶解，转入100mL 容量瓶 中，用水定容至刻度，摇匀、备用。 5.2.4 硝酸铝溶液(100 g/L): 准确称取17.60g 硝酸铝于烧杯中，加适量水溶解，转入100 mL, 容量瓶 中，用水定容至刻度，摇匀、备用。 5.2.5 氢氧化钠溶液(40 g/L):准确称取20.00g 氢氧化钠于烧杯中，加适量水溶解，转入500 mL, 容量 瓶中，用水定容至刻度，摇匀、备用。 5.3 标准品 芦丁标准品(C?HO,CAS 号：15318-4):纯度≥98%。 2 NY/T 3903—2021 5.4 标准溶液配制 芦丁标准储备液(1.00 mg/mL): 准确称取芦丁标准品0.05 g (精确至0 .0001 g), 用乙醇溶液 (5.2.1)溶解并定容至50.0mL 棕色容量瓶，摇匀，配制成1.00 mg/mL 标准储备液。 6 仪器与设备 6.1 可见分光光度计。 6.2 分析天平：感量0.0001g 及0.01 g。 6.3 水浴振荡器：振荡频率不低于240 r/min。 6.4 离心机：转速不低于4000 r/min。 6.5 涡旋混合器， 6.6 高速粉碎机：转速不低于10000 r/min。 6.7 破壁机：转速不低于10000r/min。 6.8 比色皿：玻璃。 7 分析步骤 7.1 试样制备 7.1.1 枸杞干果 去除枸杞中果柄等杂质，将样品置于一18℃冷冻12 h 以上或液氮冷冻，取出后立即用高速粉碎机粉 碎至枸杞中籽粒成粉末状，置于样品瓶中于一18℃冷冻保存，备用。 7.1.2 枸杞鲜果 去除枸杞中果柄等杂质，用破壁机匀浆，测定。 7.2 试样提取 7.2.1 枸杞干果 称取粉碎试样1g (精确至0.0001 g)于 5 0 mL 离心管中，加入20mL 乙醇溶液(5.2.1)涡旋混匀 1min, 在60℃水浴200 r/