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酶学 考试内容 酶催化作用特点 酶是一类具有高效率、高度专一性、活性可调整的生物催化剂。包括酶，核糖酶、脱氧核糖酶 酶和一般催化剂的比较：共性：1.催化效率高、用量少〔细胞中含量低〕、2.不转变化学反响的平衡点 3.降低反响的活化能 4.反响前后自身构造不变 酶作为催化剂的特点：1.酶易失活：反响条件温顺，在常温、常压、中性PH 条件下进展；2.酶具有很高的催化效率：酶催化可使反响速度提高 108-1020 倍，至少提升几个数量级；3.酶具有高度的专一性：酶对反响的底物和产物都具有高度的专一性，几乎没有副反响发生；4.酶的活性可收到调整和掌握；依据生物体的需要，很多酶的活性可受到多种调整机制的敏捷调整，包括别构调整、酶的共价修饰、酶的合成、活化与降解等。 酶的作用机理1.酶活性部位 酶的活性中心也称为活性部位，是指酶分子上与底物结合，并与催化作用直接相关的区域。假设酶是缀合酶活性中心还包括与辅因子结合的区域；假设一种酶是多功能酶，就会有多个 活性中心。活性中心是由结合基团和催化基团组成。前者负责与底物结合，打算酶的专一性， 后者参与催化，打算酶的催化力量。 2.酶活性部位的特点：〔1〕在酶分子的总体中只占相当小的局部〔1%-2%〕酶分子大多数氨基酸不与底物接触，但他们作为构造支架，有助于活性中心三维构造的稳定。〔2〕活性中心是一个三维实体：通常由假设干一级构造上不相邻的氨基酸残基组成〔3〕活性中心并不是和底物的外形正好互补的，而是在酶和底物结合的过程中，底物分子或酶分子，有时是两者的构象同时发生了肯定的变化后才互补的，这时催化基团的位置也正好在所催化底物键的断裂和马上生成键的适当位置，这个动态的识别过程称为诱导契合〔4〕位于酶分子外表的一个裂缝内：中心多是疏水氨基酸，也有少量亲水氨基酸〔5〕底物通过次级键较弱的力结合到酶上〔6〕具有柔性或可运动性 争论酶活性部位的方法： 酶分子侧链基团的化学修饰，包括①非特异性共价修饰，某些化学试剂能和酶蛋白中 氨基酸残基的侧链基团反响而引起共价结合、氧化或复原等修饰反响，使基团的构造和性质 发生转变，假设某基团修饰后，不引起酶活力的转变，则可能是非必需基团，反之，假设修饰引起酶活力的降低或丧失，则此基团可能是必需基团。②特异性共价修饰，某种化学试剂 专一地修饰酶活性部位的某一氨基酸残基，使酶失活，如用二异丙基氟磷酸〔DFP〕测定出胰凝乳蛋白酶活性中心的丝氨酸残基；③亲和标记法，合成一些与底物构造相像的共价修饰 剂，利用酶对底物的特别亲和力将 酶加以修饰标记。TPE 是凝乳蛋白酶的底物，TPCK 是凝乳蛋白酶的亲和试剂，与底物构造相像。TPCK 与活性中心组氨酸结合后，酶失去活性，从而确定酶活性中心的组氨酸残基。 动力学参数测定法：以 PH 为例，由于溶液的 PH 能影响到活性中心侧链可解离基团的解离状态，因而可以通过争论解离状态和反响速率的关系，来推断哪些氨基酸与酶催化有关。 〔3〕X 射线晶体构造分析法，可以分析酶分子的三维构造，有助于了解酶活性部位氨基酸残基所处的相对位置与实际状态，以及与活性部位有关的其他基团 〔4〕定点诱变法，转变编码蛋白质基因中的 DNA 挨次，争论酶活性部位的必需氨基酸。 酶的专一性 确定专一性：是指一种酶仅催化一个特定的反响，对底物有严格的要求。 相对专一性：在生物体内，大多酶具有的专一性是相对专一性，包括基团专一性和键 专一性。前者是指一种酶只作用于含特定官能团〔如磷酸基团，氨基，甲基等〕的分子，如磷酸酶只水解特定底物分子上的磷酸基团。后者是指一种酶只作用含有特定化学键的分子， 而不管底物分子其他局部的构造，如二肽酶特地识别二肽中的肽键，而不管构成这个肽键的 两个氨基酸是哪一种。 立体专一性是指酶对具有立体异构的底物只作用其中的一种，而对另一种无效的性质 。可分为旋光异构专一性和几何异构专性，其中旋光异构专一性指当底物具有旋光异构时， 酶只作用其中的一种。如 L 氨基酸氧化酶只能催化 L 氨基酸的氧化，对 D 型氨基酸无作用。几何异构专一性是指当底物具有几何异构体时，酶只能作用于其中的一种，如琥珀酸脱氢 酶只能催化琥珀酸生成延胡索酸，不能生成顺丁烯二酸。 有三个模型可以解释酶作用的专一性：1.锁和钥匙假说；2.诱导契合假说 3.“三点附着”假 说 “锁和钥匙”模型：该模型认为活性中心的构象是固定不变的，底物的构造必需与它的构造格外吻合才能结合，即酶和底物是锁和钥匙的关系，局限是不能解释酶的逆反响。 “诱导契合”模型：酶活性中心不是僵硬不变的构造，而是具有肯定的柔性。酶与底物 结合前后构象是不同的，一开头活性中心并不适合结合底物。然而，一旦底物与酶接近，诱导就开头了。这种诱导是双向的，一方面受到底物分子的诱导，其构象发生变化，特别是活 性中心的构象；另一方