高效液相色谱法测定酱腌菜中亚硝酸盐含量.docxVIP

高效液相色谱法测定酱腌菜中亚硝酸盐含量 青椒是中国南方的一个特色农产品。由于青椒在种植过程中过度使用化肥，以及耕地上的灌溉污染，青椒中的亚硝酸盐含量过高，损害人体健康。最新国标GB2714-2003中规定酱腌菜中亚硝酸盐含量不超过 20 mg/kg。目前测定亚硝酸盐的方法有偶氮显色光度法 1 材料和方法 1.1 标准溶液及试剂:1. 722分光光度计 (上海第三分析仪器厂) ;恒温振荡器 (常州国华电器有限公司) 。 亚硝酸钠标准溶液:0.2mg/mL, 称取亚硝酸钠30.00mg, 稀释定容于100mL容量瓶中, 使用时再稀释成20μg /mL。 对氨基苯磺酸溶液:4g/L, 称取对氨基苯磺酸0.4g溶于100ml水中, 避光保存。 N-1-萘基乙二胺溶液:2g/L, 称取N-1-萘基乙二胺0.2g溶于100ml水中, 避光保存。 饱和硼砂溶液、亚铁氰化钾:均为0.25 mol/L;乙酸锌、盐酸溶液:均为1.0mol/L。 活性碳粉:使用前以0.1 mol/L盐酸洗涤, 再以水洗2次后, 烘干待用。 1.2 n-4-氨基苯基磺酰胺的制备 分别吸取亚硝酸钠标准溶液0.00、0.20、0.60、1.00、1.50、2.00mL于50 mL比色管中, 加水至30 mL, 然后加入5.0 mL 4 g/L对氨基苯磺酸溶液和3.0 mL 6.0 mol/L盐酸溶液, 混匀, 再加入1.0 mL2g/L N-1-萘基乙二胺溶液, 混匀后用水定容, 在暗处静置15 min, 用1 cm比色杯, 以空白管调节零点, 于波长538 nm处测吸光度。 以吸光度为纵坐标, 亚硝酸离子的质量为横坐标绘制标准曲线。 1.3 亚铁氰化钾溶液 称取5.00 g样品溶于100 mL 热水中, 加5 mL 饱和硼砂溶液, 在恒温振荡水浴锅中沸水浴15 min, 取出冷至室温, 再加入10mL0.25 mol/L亚铁氰化钾溶液、10mL1mol/L乙酸锌溶液和3 g活性炭粉, 充分摇匀。以水定容至100 mL容量瓶中, 经过滤得无色清亮提取液。 1.4 绘制工作曲线 准确吸取10.00 mL提取液于50 mL比色管中, 依步骤1.2 操作绘制工作曲线, 从曲线上查得相应的亚硝酸离子的质量。 1.5 中亚硝酸钠含量 从标准曲线查到的样品中亚硝酸钠含量 (mg/L) ; V V V m-样品重量 (g ) 2 结果与讨论 2.1 测定波长的确定 试验表明, 最大吸收峰在530~540nm范围内, 本文选择测定波长为538nm。 2.2 线性范围、检出限和检出限 按本法测定, 结果表明在0~25μg /50 mL范围内亚硝酸离子与吸光度值呈良好的线性关系, 线性回归方程为Y=0.01376X+0.00119, 相关系数为0.9980, 检出限为0.5 mg/kg。 2.3 离子干扰nd 研究样品中常见的离子对反应体系的干扰情况, 当NO 2.4 加标回收率测定 应用本法对五种市售辣椒酱中的亚硝酸离子含量进行了测定, 同时测定加标样品, 加标样品扣除样品值后与加入标准量的百分比为测得的回收率, 结果见表1, 其中每个样品做5次平行测定, 各行测定值之间的相对标准偏差亦列入表1。 3 结论 试验结果证明, 采用本法测定辣椒酱中亚硝酸离子含量, 回收率高, 重现性好, 而且操作简便, 适应于批量测定。