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薄层扫描法测定人参皂苷re的含量 人参c.a.me耶属植物，主要用于干燥的根系。它是中国的一种稀有中药，被称为“甘草之王”。 1 实验材料 5年生人参, 购于长春市药材公司。薏苡仁, 由长春科技学院生物食品学院栽培实习实训基地种植和采收。 2 实验方法 2.1 对照溶液的制备 精密称取5.0mg人参皂苷Re, 用甲醇定容制成0.5mg/ml的皂苷Re对照品溶液。 2.2 薏养殖仁的制备 取鲜参317.08g, 切片。取薏苡仁63.42g (鲜参:薏苡仁=5:1) , 粉碎。用70%乙醇超声提取薏苡仁粉末30min, 过滤, 与参片拌匀闷润24h, 制成薏苡仁人参, 烘干备用。 2.3 正丁醇的提取 取供试品粉末70g, 用8倍体积的甲醇回流提取30min, 滤过, 再用漏斗分次过滤合并滤液, 旋转蒸发以浓缩, 残渣加水5Oml使溶解, 转移至分液漏斗, 乙醚提取2次, 弃去乙醚液, 水液用水饱和正丁醇提取5次, 合并正丁醇液, 用正丁醇饱和的0.1 mol/L氢氧化钠溶液洗涤2次, 再用正丁醇饱和的水洗涤, 碱液与水液合并, 用水饱和的正丁醇提取2次, 合并前后两次正丁醇液, 置蒸发皿中蒸干, 甲醇定容至10m1, 即得。 2.4 展开剂、乙酸乙酯 取对照品溶液5μl, 样品供试液1Oμl, 分别点于硅胶G薄层板, 展开剂为正丁醇:乙酸乙酯:水=40ml:10ml:50ml在1O℃下放置的下层液。显色剂为10%硫酸乙醇, 于110℃加热10min, 扫描 (λmax=530nm, λmin=650nm) 。 2.5 标准曲线的绘制 取对照品溶液lμl, 2μl, 3μl, 4μl, 5μl, 分别点于同一硅胶G薄层板上, 按上方法展开, 显色, 扫描, 测峰面积。以点样量x为横坐标, 峰面积y为纵坐标, 绘制标准曲线, 得回归方程y=9279.9x+10.47, r=0.9985。结果表明, 人参皂苷Re在0.5~5.5μg范围内, 线性关系良好。 2.6 峰面积rsd的测定 同板精密度:取同一供试品溶液, 在同一薄层板上点5个5μl点, 展开并显色后进行扫描结果, 峰面积的RSD为2.11%。 仪器精密度:对同一斑点连续扫描测定5次, 峰面积RSD为1.59%。 2.7 重复实验 取样品按同一方法点样、展开、显色, 扫描, 共测6次, 结果峰面积值基本不变, RSD=1.92%。 2.8 峰面积rsd的测定 吸取同一供试品溶液5μl, 点样于薄层板, 展开、显色后每隔30min扫描1次, 结果表明峰面积在3.0h内稳定, 峰面积的RSD为1.97%。 2.9 加标回收率测定 取已测知含量的样品, 加入一定量的人参皂苷Re, 按2.3项方法制备供试品溶液, 依法测定, 计算回收率, 结果平均回收率为97.8%, RSD为1.81% (n=6) 。 2.10 行为测试法 取供试品溶液5份, 5μl, 对照品溶液2μl, 4μl, 分别交叉点于同一硅胶G薄层板上, 依法展开、显色、扫描测定峰面积。结果5份样品中人参皂苷Re的平均含量 (mg/g) 分别为0.80, 0.78, 0.72, 0.74, 0.76, 即平均含量为0.76 mg/g。 3 主要成分的测定结果 此方法提取薏苡仁人参皂苷Re含量, 色谱斑点清晰, 测定结果准确可靠。同时人参皂苷Re为抗衰老的主要有效成分, 以其为指标可有效的控制产品质量。数据可知, 经过薏苡仁炮制的人参, 其人参皂苷Re含量为0.76 mg/g。根据薏苡仁性凉, 具有利水渗湿、清热镇静的功效;而人参性温, 具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、安神益智、生津、止渴之功效。二者相须为用, 可减轻人参由于长期或大量服用引起的燥性, 起到更好的保健功效。