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生物基磺酸盐在沙漠生态修复中的应用
沙漠化是世界上广泛面临的环境、社会和经济问题。沙漠化可分为沙漠化、土壤侵蚀和盐渍化等主要类型。
土壤中的细菌、真菌、放线菌和藻类被统称为土壤微生物,固氮、硝化、氨化、氧化等过程与土壤微生物密切相关
全水溶性生物大分子磺酸盐
1 材料和方法
1.1 磺酸盐的制备
沙子取自乌兰布和沙漠,未过筛直接使用。供试生物基磺酸盐为北京紫光英力化工技术有限公司提供的以葵花秆为原料的中试产品(平均分子量60万):生物基磺酸铵固含量为40%,折固干基养分为全N13%、K
1.2 试验仪器及设备
试验用仪器设备包括电子秤、YYW-Ⅱ电动石灰土无侧限压力试验仪、分体式风速计、风机、烧杯、培养皿、花盆及纸盘、超净工作台、振荡培养箱、生化培养箱、立式灭菌器以及离心机等。
1.3 测试方法
1.3.1 生物基磺酸盐的制备
称200 g沙子于烧杯中,按沙子重量的0.10%、0.25%、0.50%、1.00%、2.00%、3.00%、4.00%称取相应质量的生物基磺酸盐并溶于总计40 g水中(水量为沙子最大持水量的20%,实际加入的水扣除了生物基盐溶液中原有的水),搅拌均匀,称重。放置室内(外),定时称重,计算保水率,考察生物基盐的保水效果。同时,选取沙子质量3%添加量的生物基磺酸盐保水剂和传统保水剂聚丙烯酰胺进行保水效果比对评价。
1.3.2 皮护水试验
称800 g沙子置于塑料饭盒中,按照100、200、400 g/m
1.3.3 皮肤水条件的测定
结皮保水试验结束后,将塑料盒底部扎孔。沙盘表面积为0.011 304 m
1.3.4 皮肤试验
向纸盘里装定量沙子并制成沙锥(图2),按照40、60、80 g/m
用风机和便携式风速仪完成风蚀试验测定
1.3.5 对砂、固砂剂的电子显微镜分析sem
采用HITACHI S-4800扫描电镜进行形貌分析,观察沙子及固沙剂的表面形貌及微区相分离情况。
1.3.6 生长曲线及活菌数测定
(1)培养基。优化P4菌株培养配方为1 g KNO
(2)P4菌株生长曲线及其活菌数的测定。P4菌株液体菌种制备:按照实验室优化P4菌株培养基配方制得液体培养基,将活化好的P4菌株接种到液体培养基(200 m L/500 m L三角瓶)中,同时设置空白对照,37℃摇床培养2 d。培养完毕,先取菌液3 m L于紫外分光光度计600 nm处测定其OD值;再将菌液进行离心处理,共离心3次(4 000 r/min,5 min/次),获得无葡萄糖的P4菌种。
菌株生长曲线的测定:按照改良的P4菌株培养配方制得液体培养基150 m L,釆用同一三角瓶连续培养,设置4个平行;取15 m L(10%的接种量)P4菌种子液分别接种到4瓶液体培养基中,接种完毕,将三角瓶置于37℃、150 r/min摇床振荡培养。定时取3 m L菌液于紫外可见分光光度计600 nm处测定吸光值,以时间为横坐标、吸光值为纵坐标,绘制生长曲线。P4菌株活菌数目的测定:按照改良的P4菌株培养配方制得液体培养基150 m L/500 m L三角瓶1瓶,在37℃、150 r/min摇床36 h。培养结束,无菌室内取60 m L菌悬液,离心,弃上清液,无菌水洗2次,用无菌水将菌液浓缩到30 m L,用移液枪依次取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0 m L浓缩菌液于10 m L的无菌离心管中,编号为1~10,然后分别用无菌水定容至5 m L,充分混匀。活菌数采用传统涂布平板计数法测定,对应编号剩余菌液于紫外分光光度计600 nm进行比色。以菌液吸光度值为横坐标、活菌数为纵坐标,绘制标准曲线
1.3.7 生物生态学检测
(1)试验设计。试验开始于2017年5月,在内蒙古自治区阿拉善盟阿拉善左旗乌兰布和沙产业示范区内进行,以番茄为试验植株,以添加生物基磺酸盐为试验组、未处理自然沙地为对照组。试验用地面积为100 m
(2)高通量测序及生物信息学分析。提取土壤基因组DNA,对样品的16S r RNA的V3~V4区和ITS的ITS1区进行PCR扩增,建立测序文库,进行高通量测序(委托上海美吉生物医药科技有限公司测定)。先对原始数据进行过滤处理,得到优化序列。然后,在去除嵌合体序列后进行OTU聚类分析,对OTU的代表序列作分类学分析。基于OTU聚类分析结果,可以对OTU进行多种多样性指数分析以及对测序深度的检测;基于分类学信息,可以在各个分类水平上进行群落结构的统计分析。
1.4 数据分析
利用Excel 2016、Origin 8.0软件对试验数据进行处理分析。
2 结果与分析
2.1 生物基固沙剂的表征
沙子是由矿物和微小的岩石碎片组成形成的,岩石碎片由岩石经过侵蚀和风化而形成。沙粒最常见的组分是硅(以二氧化硅
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