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- 2023-07-31 发布于广东
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以上过程都可以在自动化控制的PCR扩增仪内进行,非常方便快速。 当前第30页\共有67页\编于星期三\13点 PCR技术 DNA复制 相同点 原理 DNA复制(碱基互补配对) 原料 四种游离的脱氧核苷酸 条件 模板、ATP、酶、原料、引物 不同点 解旋 方式 DNA在高温下变性解旋 解旋酶催化 场所 体外复制(PCR扩增仪) 主要在细胞核内 酶 热稳定的DNA聚合酶(Taq酶) 细胞内含有的DNA聚合酶 结果 在短时间内形成大量的DNA片段 形成整个DNA分子 思考:PCR技术和细胞DNA复制的不同点有哪些? 当前第31页\共有67页\编于星期三\13点 目的基因的mRNA 单链DNA 双链 DNA (即目的基因) 逆转录 合成 1)逆转录法:以目的基因转录成的信使RNA为模板,逆转录成互补的单链DNA,然后在酶的作用下合成双链DNA,从而获得所需的基因。 蛋白质的氨基酸序列 mRNA的核苷酸序列 结构基因的核苷酸序列 目的基因 推测 推测 化学合成 2)化学合成法 ——根据已知的氨基酸序列合成DNA法 2. 人工合成 当前第32页\共有67页\编于星期三\13点 上述三种目的基因提取的方法有何优缺点? 优点 缺点 鸟枪法 反转录法 根据已知氨基酸合成DNA法 操作简便广泛使用 工作量大,盲目,分离出来的有时并非一个基因 专一性强 操作过程麻烦,mRNA很不稳定,要求的
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