标准病理组织制片和染色技术.pptVIP

（2）Mayer氏苏木素（Mayer,1903） 苏木素 0.1g 蒸镏水 100ml 钾明矾 5g 柠檬酸 0.1g 水合醛 5g 碘酸钠 20mg 当前第62页\共有117页\编于星期三\6点 将蒸包馏水稍为加温，加入苏木素不停地搅拌直至溶解，再加入钾明矾，令其溶解后再加入碘酸钠过滤后即可使用，染色时间10－20分钟，如果先用天表蓝为媒染剂，染色时可在2－3分钟。 当前第63页\共有117页\编于星期三\6点 配制苏木素的注意事项 1、苏木素可以配成5%或10%，让其氧化产生苏木红，然后根椐每次配制溶液的量，再决定加入多少。 2、在配制苏木素时，三角烧瓶的选择也很重要，例如，配制500ml 的溶液，应选用1500－2000ml的三角烧瓶，配制1000ml则可选3000ml的烧瓶，这样溶液在加入氧化汞时，才不会喷出瓶外。 当前第64页\共有117页\编于星期三\6点 3、冰醋酸一定要在溶液过滤后加入如果过滤前加入，则在过滤时溶液很难通过滤纸，这主要是冰醋酸草可造成对滤纸的损害。 当前第65页\共有117页\编于星期三\6点 (二）伊红的配制 1、1%伊红洒精的配制 伊红（水溶） 5g 70%-75%酒精 500ml 取少许蒸馏水来溶解伊红或称曙红，当完全溶解后，再加入酒精，然后再加入少许冰醋酸，此时溶液即可变为鲜红色。 注意：冰醋酸一定要加进去如果没有加入冰醋酸，细胞浆将难以染得鲜艳。 当前第66页\共有117页\编于星期三\6点 2.切片染完苏木素后的分化，应该如何控制和注意什么问题？ （1）分化液中盐酸不能高于1%，否则会因分化过强而将已着色的颜色大部分脱水，造成染色过浅。 （2）对各种组织应视情况而定，如淋巴结的切片，应分化较长时间等。 （3）分化完后，应在显微镜下观察，如发现核中的物质不清楚，则应继续分化至清晰为止。 （4）要认真操作，细心观察，不断总结。 当前第67页\共有117页\编于星期三\6点 胃类癌（瘤细胞小而一致） 当前第68页\共有117页\编于星期三\6点 瘤细胞的多形性 当前第69页\共有117页\编于星期三\6点 病理性核分裂像 当前第70页\共有117页\编于星期三\6点 平滑肌、平滑肌瘤和平滑肌肉瘤 当前第71页\共有117页\编于星期三\6点 大肠腺体、腺瘤和腺癌 当前第72页\共有117页\编于星期三\6点 正常鳞状上皮、乳头状瘤和鳞状细胞癌 当前第73页\共有117页\编于星期三\6点 淋巴管转移癌 当前第74页\共有117页\编于星期三\6点 肺淋巴管转移癌 当前第75页\共有117页\编于星期三\6点 冰冻切片 当前第76页\共有117页\编于星期三\6点 一、种类： 1、低温恒冷箱切片法 2、二氧化碳冰冻切片法 3、甲醇循环制冷冰冻切片法 4、半导体冰冻切片法 5、氯乙烷冰冻切片法 当前第77页\共有117页\编于星期三\6点 二、冰冻切片的目的 1、在手术进行中。突然发现病人的病变与原诊断不相符合或者怀疑时需要病理给予确定。 2、了解淋巴结内是否有转移的肿瘤细胞或者转移的程度，以利于确定以后的治疗措施。 当前第78页\共有117页\编于星期三\6点 3、对于已确定恶性肿瘤的病人则需要了解其手术范围是否足够，上下切缘是否有残存的肿瘤细胞。 4、在剖腹探查所发现的肿块。 5、显示组织中的脂肪类物质。 6、某些酶的显示如ATP酶琥珀酸脱氢酶等。 7、神经病理学中的某些染色法。 8、对某些物质所进行的免疫荧光的研究。 当前第79页\共有117页\编于星期三\6点 三、冰冻切片的操作 （1）本室现有Shandon-AS620E型冷冻切片机的主要性能。左边的切片台可达到-60左右，冷冻箱内在0～-30间可任意调节，箱面上有电子控制板，装有急速冷冻，即放上标本启动该键机器马上进行冷冻工作并持续10分钟；有冷冻台温度显示冷冻箱内温度显示；有即时除霜内温度显示； 当前第80页\共有117页\编于星期三\6点 有即时除霜键，启动该键机器可持续工作15分钟，将工作间顶部后面的制冷栅上的霜除掉；有照明键，启动该键可照明工作间；有消毒键当进行一星期的工作后，启动该键可对工作间进行消毒；有工作间面的密锁键启动键可将工作间锁住，除此之外该机的左边有四个按键两个为快速自动进退、两个为微小进退、另有一个手动旋钮，调节修块时的进退。 当前第81页\共有117页\编于星期三\6点 （2）切片取末经固定的组织不能太大太厚，