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2种多潘立酮片在健康人体的生物等效性研究 多潘立酮是一种抗呕吐作用的甲基丙烯酸酯受体抗剂。它主要用于血脑屏障外的化学受体触发区域，通过阻断外部神经鞘，增加胃和十二指肠的运动，增加下食管的括约肌压力。临床上广泛用于治疗脾胃肿胀、食管反流和恶心呕吐。多潘立酮在人体内的血药浓度较低,文献报道检测方法有放射免疫(RIA)法、高效液相色谱(HPLC)法 1 材料表面 1.1 高效液相色谱数据处理 3200QTRAP型液相色谱-串联质谱仪,配有电喷雾离子化源(ESI)以及Analyst 1.4.1数据处理软件(美国Applied Biosystem公司);Agilent 1100高效液相色谱系统,包括四元输液泵、自动进样器、切换阀(美国Agilent公司);Eppendorf高速离心机(德国艾本德公司)。 1.2 酮片西安杨森制药,实行酮片 受试制剂:多潘立酮片(北京星昊医药股份有限公司,批号:081201,规格:每片10 mg);参比制剂:多潘立酮片(西安杨森制药有限公司,批号:080925714,规格:每片10 mg);多潘立酮对照品(北京星昊医药股份有限公司,批号:HDPC0340014,含量:99.8%);内标:替米沙坦对照品(广州清平制药有限公司,批号:M060601,含量:99.8%。);甲醇为色谱纯,其他试剂均为分析纯;空白人血浆由第二炮兵总医院血液科提供。 2 方法和结果 2.1 离子喷射成分配 色谱柱:Agilent TC-C 离子源:离子喷雾离子化(ESI)源;正离子方式检测;离子喷射电压:-5 500 V;温度:570℃;源内气体1(GS 2.2 溶液的制备 2.2.1 g/lg-甲醇溶液 准确称取多潘立酮对照品10.00mg,置于50 m L容量瓶中,加甲醇-水(1∶1)溶解,并稀释至刻度,配制成浓度为0.20 mg·m L 2.2.2 内标溶液 准确称取替米沙坦对照品10.00 mg,置于100 m L容量瓶中,加甲醇溶解,并稀释至刻度,配制成浓度为0.1 mg·m L 2.3 内标溶液和沉淀剂溶液 精密取血浆样品100μL,置于1.5 m L EP管中,加入内标溶液100μL、沉淀剂甲醇200μL,涡旋30 s,离心(13 200 r·min 2.4 方法学的检验 2.4.1 带标准曲线多潘立酮标准使用液 分别取6名受试者的混合空白血浆100μL,按“2.3”项下方法操作,进样10μL,得色谱图2A;将一定浓度的多潘立酮标准溶液和内标溶液加入空白血浆中,同法操作,得色谱图2B;取受试者给药后收集的血浆样品,同法操作,得色谱图2C。结果表明,内源性物质不干扰多潘立酮和替米沙坦的测定。 2.4.2 血药浓度评定 取空白血浆100μL,置于1.5 m L EP管中,加入多潘立酮系列标准溶液100μL,配制成相当于血药浓度为0.1、0.3、1.0、3.0、10.0、25.0、50.0 ng·m L 2.4.3 返回率和准确度测试 按“2.4.2”项下方法操作,制备多潘立酮低、中、高(0.3、6.0、40.0 ng·m L 2.4.4 提取回收率 2.4.5 浓度测定方法 配制低、中、高3种浓度的稳定性QC样品,每浓度3样本,按“2.3”项下方法操作,测定浓度。分别进行-20℃冰冻放置50 d、反复冻融3次、室温放置12 h稳定性试验。结果显示,所有稳定性试验测得量与加入量的相对偏差(RE)均15%,说明分析测试过程中的样品较为稳定。稳定性试验结果见表2。 2.5 多潘基廷片对健康人体的药物动力学和生物等效试验 2.5.1 试验1,国土小学m 22名健康成年男性志愿者,平均年龄(23.60±2.39)岁,身高(1.70±0.05)m,体重(63.40±5.16)kg,试验前进行体格检查,肝肾功能、心率、血压和心电图等均正常。试验前1个月未服用过其他药,试验期间禁烟、酒和含咖啡因类饮料,避免剧烈运动。签署知情同意书。试验方案经第二炮兵总医院医学伦理委员会审批批准。 2.5.2 口服、参比制剂 用双周期两制剂随机交叉试验设计。将22名健康男性受试者随机分为2组,每组11人,禁食12 h后,次日清晨空腹单剂量口服受试制剂或参比制剂10 mg,服药饮水约200 m L,服药后2 h内禁水,给药4 h后进食统一标准餐。22名受试者服药1周后交叉给药,重复上述试验。 2.5.3 酶前处理 分别于给药前(0 h)及给药后0.083、0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、4、6、8、12、24、36 h时取肘静脉血3.0 m L,置肝素处理过的试管中,3 000 r·min 2.5.4 数据处理 采用生物利用度研究数据处理通用程序(简称BAPP 2.0,由中国药科大学药动学中心提供)计算药动学参数,采用梯形法计算AUC 2.5.