SN_T 2964-2011植物病毒检测规范.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2964—2011植物病毒检测规范Norm for detection on plant viruses2011-12-01 实施2011-05-31 发布中华人民共和国车发布国家质量监督检验检疫总局女码防 SN/T言本标准按照GB/T1.1-2009 给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国深圳出人境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国云南出入境检验检疫局、中华人民共和国北京出入境检验检疫局。本标准主要起草人：郑耘、陈枝楠、李明福、娄定风、李芳荣、丁元明、邓丛良。 SN/T 2964--2011植物病毒检测规范1范围本标准规定了取样、运输和接收、检测人员、仪器设备、药品试剂、检测方法、样品、毒源的制备与保存等方面的要求和规范。本标准适用于进出境植物及其产品中病毒的检疫鉴定。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T27402实验室质量控制规范植物检疫SN/T 1193基因检验实验室技术要求SN/T1840植物病毒免疫电镜检测方法SN/T 2122进出境植物及植物产品检疫抽样3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1植物病毒plant virus一类由核酸和蛋白质外壳组成的具有侵染活性的细胞内寄生病原物。3.2症状symptom植物受病原物或不良环境因素的侵扰后，内部的生理活动、外观和生长发育所显示的某种异常状态。3.3鉴别寄主differential host用来鉴别病毒或病毒株系的植物，所产生的特征性症状可用来区分植物上常见的病毒。3.4取样 sampling用一定的方法从大批物料中取出少量有代表性物料的过程。3.5隔离检疫 isolated quarantine是国家植物检疫机关按照有关检疫规定，在指定的场所对进出境植物种子、苗木及其他繁殖材料，实施隔离试种、观察、检疫和处理的过程。3.6空白对照 blank不给予任何处理的对照。1 SN/T 2964—20113.7 negative control阴性对照从健康植物或其产品样品中制备的不含有目标病毒的样品。3.8阳性对照 positive control从标准病毒毒源中提取的含有目标病毒的样品。3.9同源性homology两个病毒基因片段的核苷酸序列间的相似程度。4检测人员需具备的条件和素质要求按照GB/T27402中人员的要求执行-5取样及接收样品5.1 取样5.1.1取样计划根据样品的特性和样品中可能存在的病毒表现出的症状特点，确定取样方法、取样数量、取样工具、保存方法等。对实验室检测发现疑似病毒，但还不能做出准确判定，需要更多多样品进行确认时，需重新制定更为合适的取样计划，进行再次取样。5.1.2现场取样取样人员根据相关标准有对性地对样品进行检套和取样并填写相关记录单（包括采样时间、数量、采样人、采样标准等信息）。取样按照SN/T2122的规走执行。5.2传递与运输样品应放在耐受性好、密闭、防渗漏~具有防交叉污染的样品袋中。在样品袋外部要贴有标签（表明样品编号、货物名称、取样部门、取样时间等信息）。对需要低温保存和运输的样品应采取必要措施。保证样品在传递过程中能够保持原有形态，防止可能含有的有害生物逃逸、扩散，确保样品真实、安全、及时传递到实验室。随检样品应附有送检单，送检单应与样品分开放置。运输样品的车辆应进行定期的消毒处理。5.3接收样品核对样品与送检单，检查包装及样品的完好情况，有无污染，对不符合要求的应重新取样。6仪器设备和设施设备的配置应能满足隔离检疫、实验室检测和毒源保存等的工作要求。建立设备的确认、维护和校准等管理程序，以保证设备符合预期使用要求。计量器具应有检定合格标识。2 SN/T 2964--2011大型和关键设备应有使用、维护和校准记录。有故障或者停用的设备应有明显的标识，以防止误用。应制定植物病毒检测过程中的关键设备发生故障时的应急预案，应急措施应不影响检测质量。植物病毒检测的主要设施和设备包括：足够开展植物病毒检测的实验室、隔离检疫温（网)室、微量榨汁机、酶标仪、PCR仪、定量 PCR仪、序列测定仪、超(高)速冷冻离心机、台式冷冻离心机、高压灭菌锅、pH计、天平、紫外分光光度计、冰箱、恒温培养箱等。7 药品试剂建立和实施植物病毒检测药品试剂管理程序。包括药品试剂的评估、选购、确认、保存、使用、监控以及库存管理。药品试剂储存期间,应定期对药品试剂的灵敏度,特异性和稳定性进行比对试验，给出评价结果。8隔离检疫8. 1 制定隔离检疫计划对每一批隔离植物制定一份书面的《隔