第十二章色谱分析法.pptVIP

概 述;1、色谱法的产生 色谱法是一种分离技术，它是俄国植物学家茨维特1906年创立的。分离植物叶子中的色素时，将叶片的石油醚（饱和烃混合物）提取液倒入玻璃管中，柱中填充CaCO3粉末（CaCO3 有吸附能力)，用纯石油醚洗脱（淋洗）。色素受两种作用力影响;（1）一种是CaCO3 吸附，使色素在柱中停滞下来 （2）一种是被石油醚溶解，使色素向下移动 各种色素结构不同，受两种作用力大小不同，经过一段时间洗脱后，色素在柱子上分开，形成了各种颜色的谱带，这种分离方法称为色谱法。 ;Tsweet的实验;12-1 概述 ;12-1 概述;12-1 概述; 随着被分离样品种类的增多，该方法广泛地用于无色物质的分离，“色谱”名称中的“色”失去了原有的意义，但“色谱”这一名称沿用至今。;我国情况;;二、色谱分析法分类;液相色谱—液体作流动相 （1）液固色谱：液体作流动相，固体吸附剂作固体相。 （2）液液色谱：液体作流动相，固定液作固定相。 超临界液体色谱——超临界流体作色谱流动相。 ;2、按操作形式分类 （1）柱色谱： 填充柱色谱—固定相填充到柱管内 毛细管柱色谱—把固定相涂在毛细管内壁上，中间是空的。 （2）纸色谱：滤纸为固定相的色谱法，流动相是含一定比例水的有机溶剂，样品在滤纸上展开进行分离。 （3）薄层色谱：把固体固定相压成或涂成薄膜的色谱法。; 3、按分离原理分类 （1）吸附色谱：利用吸附剂表面对被分离的各组分吸附能力不同进行分离。 （2）分配色谱：利用不同组分在两相分配系数或溶解度不同进行分离。 （3）离子交换色谱：利用不同组分对离子交换剂亲和力不同进行分离。 （4）凝胶色谱：利用凝胶对分子的大小和形状不同的组分所产生的阻碍作用不同而进行分离的色谱法。 ;§ 12(1)-2 色谱图及色谱常用术语;二、色谱图中的基本术语 ;1、基线—在实验操作条件下，色谱柱后没有组分流出的曲线叫基线。 稳定情况下，一条直线。 基线上下波动称为噪音。;2、色谱峰的高度h （1）峰高h —色谱峰最高点与基线之间的距离，可用mm ,mV， mA表示。峰高低与组分浓度有关，??越高越窄越好。 ;3. 色谱峰的宽度 标准偏差— σ 峰高0.607倍处的色谱峰宽的一半。 ;峰底宽Wb—色谱峰两侧拐点所作切线在基线上的距离 Wb =4 σ 半峰宽W1/2—峰高一半处色谱峰的宽度 W1/2 =2 .354 σ Wb =4 σ W1/2 =0.589Wb ; 4. 色谱峰面积A ——色谱峰与峰底所围的面积。 对于对称的色谱峰 A=1.065h W1/2 对于非对称的色谱峰 A=1.065h(W 0.15+W 0.85)/2 ;5. 色谱保留值——定性的依据;（1）死时间t0——不被固定相吸附或溶解的组分流经色谱柱所需的时间。 从进样开始到柱后出现峰最大值所需的时间。 气相色谱—惰性气体（空气、甲烷等）流出色谱柱所需的时间。 ;(2)保留时间tR ———组分流经色谱柱时所需时间。进样开始到柱后出现最大值时所需的时间。操作条件不变时，一种组分有一个tR定值，定性参数。 ;（3）调整保留时间t’R—扣除了死时间的保留时间。t’R=tR-t0又称校正保留时间，实际保留时间。 t’R体现的是组分在柱中被吸附或溶解的时间。 ;保留值用体积表示： （4）死体积V0—不被固定相滞留的组分流经色谱柱所消耗的流动相体积称死体积，色谱柱中载气所占的体积。 V0=t 0F0 柱后出口处流动相的体积流速mL/min ;（5）保留体积VR —组分从进样开始到色谱柱后出现最大值时所需流动相体积，组分通过色谱柱时所需流动相体积 VR =t RF 0 （6）调整保留体积V’R—扣除了死体积的保留体积，真实的将待测组分从固定相中携带出柱子所需的流动相体积。 V’R= t’RF 0 ;（7）相对保留值γ2，1或γi ,s —在相同操作条件下，组分2或组分i对另一参比组分1或s调整保留值之比;概念、表示方法及计算公式汇总;;三、分配平衡;2、分配比k’(又叫容量因子，容量比);总结：;§ 12(1)-3 色谱法的基本理论 ; 塔板理论把色谱柱比作一个分馏塔，假设柱内有n个塔板，每个塔板高度称为理论塔板高度，用H表示，在每个塔板内，试样各组分在两相