坛紫菜叶状体中藻胆蛋白和叶绿素a的测定.docxVIP

坛紫菜叶状体中藻胆蛋白和叶绿素a的测定 0 紫菜 1 1.1 藻体的选择和成熟 不同类型的甘薯由应用实验室提供，采用了美国能源大学的祭坛植物育种和应用。选择完整的海藻，颜色正常，生长旺盛的藻类。 1.2 气培养藻体的制备 从褐红色、紫色、红色、桔红色、绿色5种不同色泽的藻体幼苗中挑选长度为3～5 cm、完整健康的藻体进行充气培养, 实验室内温度维持在 (20±1) ℃, 并定期更换培养液.待藻体生长至长度为40～80 cm时, 阴干后冷冻收藏备用. 1.3 实验藻体的培养 本温度实验设定了26、27、28、29、30 ℃共5个高温实验组和1个对照组 (21 ℃) , 实验藻体包括品系Z-17的F3、Z-26的F3、Z-61的F3、Z-81的F3 4个不同品系.挑选完整健康的实验藻体 (3～5 cm) 放入锥形瓶中, 在不同温度的光照培养箱中静置培养.光周期为12 L∶12 D, 光强为1 200～1 400 lx.培养期间每天观察记录叶状体生长状况和溃烂程度, 摇动培养液2次以使其混合均匀.每组藻体培养10 d, 藻体阴干后冷冻收藏备用. 1.4 叶绿素a含量测定 藻胆蛋白的测定方法参照文献 叶绿素a含量的测定方法参照文献 1.5 防止吸潮的测定 称取阴干藻体0.100 g, 放入培养皿中于105 ℃烘干3 h, 温度稍降后即称其质量 (防止吸潮) . 1.6 光合预处理法 1) 研磨与粉碎.在对实验藻体进行处理时, 一组进行研磨, 另一组进行粉碎, 其他实验条件均相同, 分别进行藻胆蛋白与叶绿素a含量的测定. 2) 黑暗与光照.在藻胆蛋白和叶绿素a的提取过程中, 一组避光 (黑暗) , 另一组在3000 lx光照条件下提取, 其他实验条件均相同, 分别进行藻胆蛋白与叶绿素a含量的测定. 3) 被测藻体的质量.被测藻体质量分别为0.010、0.030、0.050 g.其他实验条件均相同, 分别进行藻胆蛋白与叶绿素a含量的测定. 4) 冻融次数.实验藻体研磨后, 一组不冻融, 放在4 ℃冰箱中提取;一组冻融3次;一组冻融6次.其他实验条件均相同, 然后分别进行藻胆蛋白含量的测定. 5) 研磨温度.在对实验藻体进行研磨时, 一组在室温条件下研磨, 一组用4 ℃的冷水保持低温条件研磨.其他实验条件均相同, 然后分别进行藻胆蛋白含量的测定. 1.7 叶绿素a含量的计算 藻胆蛋白和叶绿素a含量的计算参照文献 2 2.1 藻胆蛋白和叶绿素a的质量比 如图1、图2所示, 不同色泽的坛紫菜藻胆蛋白和叶绿素a的含量差异较大.在所进行测定的5种不同色泽的坛紫菜中, 褐红色型坛紫菜的藻胆蛋白和叶绿素a的质量比均为最高, 分别达到114.87 mg/g和8.83 mg/g;紫色型的藻胆蛋白的质量比高达108.05 mg/g, 但是叶绿素a的质量比却较低 (4.64 mg/g) ;桔红色型藻体的藻胆蛋白和叶绿素a的质量比均比较低, 分别为59.81 mg/g和4.58 mg/g;绿色型的藻胆蛋白的质量比最低 (55.39 mg/g) .统计分析表明桔红色和绿色藻胆蛋白的质量比差异显著 ( 2.2 高温对藻胆蛋白和叶绿素a含量的影响 在不同温度的培养实验中, 随着温度升高藻体容易出现溃烂.在28、29 ℃培养的藻体颜色明显变淡, 生长缓慢或者不生长.在4个不同品系的温度实验中, 除Z-26的F3外, 对照组藻体的藻胆蛋白和叶绿素a含量均低于高温培养条件下生长的藻体.除Z-17的F3的27 ℃实验组外, 各高温实验组藻体的藻胆蛋白和叶绿素a含量随着温度升高而增加 (见表1) . 2.3 光照和光照对提取藻胆蛋白的影响 1) 研磨与粉碎.经过研磨藻体的藻胆蛋白和叶绿素a测定结果明显高于经过粉碎的.经过研磨, 紫色型和桔色型藻体的总藻胆蛋白含量分别是经过粉碎的3.8倍和2.4倍.经过研磨藻体的叶绿素a的质量比测定结果分别是经过粉碎的10.4倍和11.9倍 (见表2) . 2) 光照与黑暗.采取避光措施的紫色型和桔色型藻体的藻胆蛋白的质量比分别比在3 000 lx光照条件下提取的高24.9 %和26.6 %.而光照对叶绿素a测定结果的影响更大.在光照条件下提取的紫色型和桔色型藻体的叶绿素a的质量比测定结果分别为0.48 mg/g和2.04 mg/g;而在铝箔包裹的棕色瓶中提取的藻体, 叶绿素a的质量比分别达到4.82 mg/g和5.47 mg/g, 分别是光照下提取的10.0倍和2.7倍 (见表2) . 3) 被测藻体的质量.被测藻体的质量对藻胆蛋白和叶绿素a的质量比的测定结果没有明显的影响 (见图3, 表3) . 4) 冻融次数与研磨温度.藻胆蛋白的含量随着冻融次数的增加而略有增加, 研磨温度对藻胆蛋白的测定结果影响较小 (见表4) . 3 3.1 藻